怀槐培养细胞生异黄酮的条件优化与控制.pdfVIP

铎撬培养缫脆生产异黄酮的条件优化与控铡 摘 要 怀槐是我国珍贵的野生药用植物，资源稀少，其药用成分异黄酮具有显著的 保肝、抗肿瘤、抗氧化及防治骨质疏松镎药理活性。为了通过怀槐细胞的大规模 嫱养生产怀攘器黄酮实瑰怀槐药用资溺的可持续剥用，本论文对怀槐培养细胞生 产异黄磊豹爨浮条件送行了侥伲控翻研究，并在lO秀气秀式生貔反应器中避罨亍 了试验。 在单因綮实验确定影响怀槐细胞生产异黄酮的主要培养基组分和作用浓度 法)对培养基组成进行全局寻优。建立豹优化模型礁确性高，依赖模型由RAGA 全局寻优获得的最佳培养撼组合是149．68 mg／LKN03、 mg／L(NH)2S04、2936．10 0．01 mg／L2，4，D狸0．19 6一BA，染誊喜本素产率达到14．13mg／L，}E优化前掇 mg／L 离18国9倍，跫正交试验饶讫静2．54嫠，表爨运雳该方法霞诧悔魏纲施舍藏舅黄 酮的培养条件是可行的，优化后的培养撼可以使怀槐细胞异黄酮合成能力有很大 的提高。 建立‘芗怀攘蘩您悬浮麓莠续稿化麓力学模型。该模壁班垮养爨中戆碳滚慧瓣 在胞外分解以及分解产物在胞内的代谢为建模依据，考察了脆内外的蔗糖代谢、 _|j6i内结构组分变化、胞内中间组分的变化、细胞呼吸损失以及胞内外染料木素的 Powell共辗方囊法对蒺登参数送行霞纯，确立了模蘩豹最貔参数缀合。该模鳌与 露验数据具有较好的符合性，通过模型可以直观的预测细胞生长、呼吸以及次生 代谢产物染料木素合成，对怀槐细胞悬浮培养具有很好的指导性。 研究了激发对怀槐悬浮培养细胞生长、染料本豢合成及其产率的影响，发现 25℃对怀捷编缒染耩本素合或最有翻，28℃对绥藏生长最爵，澄发低于25℃对 于细胞生长和产物合成均不利。结合温度对细胞生长和染料木索合成的动态考 察，制定出在培养前9天控制培养温度为28。C，自培养第9天，调节培养温度 为25℃，壹至培莠到筻12天的怀撬悬浮跨养缨照抉遽，圭长帮染料术素毫效台娥 的分阶段温度控策略，饺缁驻染料本豢产率分期比25℃和28℃遗续培养时携商 1．14和2．50倍。反应器验证试验表明，通过分阶段温度调控培养，平均染料术 索产率达到了26。66 mg／L。 荧键谣：悔穗悬浮蘩养 羚黄酮入王辑经溺络 实数编羁麴遮遗传算法缭 构化动力学模型温度调控气升式生物反成器 andControlofCultureCondition Optimization forIsoflavoneProductionofMaackiaamurensisPlant through Cell Engineering Abstract Maackiaamurensis．awildmedicinalinChina．isknownforits precious plant element havemarked as isoflavones，which pharmacologicaleffects，such antioxidationand is exhausted．Inorderto a osteoporosisinhibition．However,itbecoming provide foundationforsustainableutilizationofthemedicinalmetaboliteresourceofMamurensis