促肾上肾皮质激素释放因子1型受体经cAMP%2fPKA信号通路对U87MG细胞凋亡机制分析.pdfVIP

目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………3 英文缩写………………………………………………………………………6 研究论文促肾上腺皮质激素释放因子1型受体经cAMP／PKA信号通路 对U87MG细胞凋亡机制的研究 前言………………………………………………………………………………………………1／ 日U舌……………………………………………………………………………………………… 材料与方法………………………………………………………………8 结果……………………………………………………………………．．19 附图……………………………………………………………………一21 附表……………………………………………………………………．．24 讨论……………………………………………………………………………………………·26 结论…………………………………………………………………………………………一29 参考文献………………………………………………………………“29 CRFR3)信号转导通路的研究进展…………………………………33 致谢…………………………………………………………………………一41 个人简历……………………………………………………………………．142 万方数据 中文摘要 促肾上腺皮质激素释放因子1型受体经cAMP／PKA信号通路对 U87MG细胞凋亡机制的研究 摘 要 背景：胶质瘤是颅内最常见的原发肿瘤，统计资料表明其发生率约占 颅内肿瘤的40—50％，其多呈浸润性生长，与正常脑组织间常无明显分界， 易侵犯重要神经结构，具有预后差、复发率、高致死率的特点。传统的治 疗方法包括手术切除为主，辅以放疗、化疗，血脑屏障的存在使常规化疗 药物难以发挥作用，预后不佳。随着分子生物学的发展寻找新的治疗手段 成为是神经外科研究领域的主要内容之一。 factor 98 CRF)是11年 促肾上腺激素释放因子(corticotropin．releasing Vale等从绵羊的下丘脑中提取分离出的含有41个氨基酸的激素类神经肽 …I。多分布于人类中枢神经系统下丘脑室旁核，外周系统中也分布广泛。 CRF主要作用于下丘脑一垂体一肾上腺轴(唧A)，调节机体在应激状态下 的神经内分泌，自主神经，免疫反应等方面的协调作用I。。】。近年来许多文 献报导C盯相关肽及其受体在许多肿瘤细胞生长中都发挥了重要的作用。 癌细胞中的表达，进而促进卵巢癌细胞凋亡[6】。但是，CRY对脑胶质瘤的 作用及机制国内外鲜有报道。我们设计并实施了本实验。 U87细胞凋亡的影响。 方法： l Elisa方法法检测cAMP的浓度 复苏U87细胞接种于6孔培养板中，每组置3个重复孔。37。C，5％C02， 万方数据 中文摘要 IBMX 上清液后，在吸光度值检测仪中检测cAMP浓度。 2荧光定量PCR检测PKA基因表达 Trizol法提取细胞总RNA，1．5％琼脂糖凝胶电泳检测其完整性。按 Premier 反转录试剂盒说明书合成cDNA，进行聚合酶链反应。应用Primer 5．0软件，设计目的基因和内参基因，由北京赛百盛公司合成。置于QIAGEN Rotor-GeneRealTime Q 退火／延伸30s，40个循环；最后，采用2．△△Ct法进行数据的相对定量