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微生物标本检验的采集 正确采集标本的意义 正确采集临床微生物标本，直接影响微生物培养鉴定和药敏结果。可靠的检验结果可以指导临床诊断治疗，为临床科学用药和成功的控制感染提供依据，是合理使用抗生素，延缓细菌耐药，和监测医院感染的第一步。因此应正确采集微生物标本。 血液标本的微生物检验 一、检验项目 血液的细菌培养 二、标本采集 【标本采集前的注意事项】 应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。 【标本送检指征】 病人出现以下临床表现，或同时具备以下几种临床表现时应采集血培养。 1 发热（≥38℃）或低温（≤36℃） 2 寒战 3 白细胞增多（＞10×109/L，特别有“核左移”时） 4 粒细胞减少（成熟的多形核白细胞＜1×109/L） 5 血小板减少 6 皮肤、粘膜出血 7 昏迷 8 多器官衰竭 9 血压降低 10 呼吸加快 几种特殊情况： 1 可疑新生儿败血症时，除发热或低温外，很少培养出细菌，应增加尿液和脑脊液培养。 2老年菌血症病人可能不发热或不低温，如伴有身体不适、肌痛或中风，可能是感染性心内膜炎，也应采取血培养。 骨髓培养与血液培养的送检指征是基本一致的，临床常规血液感染有指征时以抽取血培养为主。但当骨髓炎时或长期使用抗菌药物患者，抽取骨髓培养阳性率会远高于血培养。 【标本采集的容器】 双相血培养瓶 【标本的采集方法】 防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染是血培养的关键问题，采血前严格执行消毒程序是十分重要的。 皮肤消毒程序 严格按以下三步法进行： ①75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上。 ②用一根碘酊或聚维酮碘（碘伏）棉签消毒皮肤，1～2%碘酊作用30s或碘伏作用60s，从穿刺点向外以1.5～3cm直径画圈进行消毒 ③75％酒精脱碘。 对碘过敏的病人只能用75%酒精消毒，消毒60s，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。 2.培养瓶消毒程序 ①用75％酒精消毒血培养瓶橡皮塞子。 ②酒精作用60s。 ③在血液注入血培养瓶之前，用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然后注入血液。 3.培养瓶接种程序 抽取血液后，不要换针头，直接注入血培养瓶中，轻轻颠倒混匀，以防血液凝固。如果同时作需氧和厌氧培养，应先将标本接种到厌氧瓶中，然后再注入需氧瓶，严格防止将空气注入厌氧瓶中。 【标本采集注意事项】 1.血培养采集的时间和频率 ①采血培养应尽量在抗菌药物使用之前，在24h内采集2～3份血培养（一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养），每次2瓶。因为研究已证实，2～3份血培养足以检测所有的菌血症和真菌血症。 ②入院前2周内接受抗菌药物治疗的患者，连续3天，每天采集2份。 ③对间歇性寒战或发热的患者，应在寒战或体温高峰到来之前0.5～1h采集血液，或于寒战或发热后1h采集。因为发热时血液中可能没有细菌。 ④可疑为急性原发性菌血症、真菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎的患者，应在不同部位采集2～3份血培养。 ⑤不明原因发热，如隐性脓肿、伤寒热和波浪热，先采集2～3份血标本，24～36h后估计体温升高之前，再采集2份以上。 ⑥可疑为菌血症或真菌血症，但血培养持续阴性，应改变血培养方法，选择其它种类的培养瓶，如高渗培养瓶，中和抗生素培养瓶，结核菌培养瓶等，以获得罕见的或苛氧的微生物。 ⑦可疑为细菌性心内膜炎，在1～2h内多部位采集3份血标本，如果 24h阴性，再采取3份以上的血标本。 2.采血量 成人：推荐每个血培养瓶应加的血量为5～10ml。 儿童：因很难获得大量的血液，一般静脉采血1～5ml用于血培养 * 血液量太多或太少都不利于细菌的检出，血液的培养量每增加1ml,阳性率增加3～5％。人体血液内包含各种抑制细菌生长的因子或抗生素，注入血液太多可能会抑制细菌的生长。 3.骨髓标本的采集 均有医师在病灶部位或髂前（后）上脊严格消毒后抽取骨髓，采量一般为1～2ml。按要求注入专用培养瓶，立即送检。 【标本的送检地点】 检验科微生物室，非正常上班时间送检验科急诊化验室。 * 标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。 【标本的保存】 含血样的培养瓶应立即送往实验室；如不能及时送检，应将其放在室温，切忌冰箱存放。因为某些苛氧菌可在冰箱温度中死亡，而使培养阳性率下降。 在运往实验室的途中如果天气寒冷，应采取一定的保温措施。 痰标本的微生物检验 一、检查项目 痰液的细菌培养、真菌培养、真菌涂片、结核菌涂片。 二、标本采集 【标本采集前的注意事项】 应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。 【标本送检指征】 1 咳嗽、咳痰：痰液可为脓性、血性、