微生物的培养基创新.pptVIP

第三节 微生物的培养基 一、培养基的概念 二、培养基的配制原则 三、培养基的类型及应用 四、培养基的配制过程 重点:掌握培养基的概念、配制原则和类型。 难点：学习选择和配制培养基 一、配制培养基的原则 1.选择适宜的营养物质 根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。 如：自养、异养 ①细菌 -- 牛肉膏蛋白胨(普通肉汤)培养基； ②放线菌 -- 高氏1号合成培养基； ③酵母菌 -- 麦芽汁培养基，马铃薯蔗糖 ④霉菌-- 查氏培养基，马铃薯蔗糖 4.原料来源的选择 ⑴微生物学实验--便于观察实验现象 原料：选择易加工，使用方便的原料。 碳源--试剂纯葡萄糖、蔗糖、淀粉等。 氮源--蛋白胨、牛肉膏、酵母膏。 ⑵发酵生产 原料--廉价且易于获得的原料 生产酱油：碳源:麸皮  氮源:豆粕。 甲烷发酵—废水、废渣; 人畜粪便及禾草 常用的发酵工业原料：麸皮 、米糠、玉米浆、酵母浸膏、酒糟、豆饼、花生饼等。 ５.选择适宜的灭菌处理方法 获得纯种微生物，必须避免杂菌污染，需对所用器材和工作场所进行消毒与灭菌。 培养基:高压蒸汽1.05kg/cm2(121.3℃，15～30min） 不耐热含糖培养基:0.56kg/cm2(112.6℃,15～30min)　　对糖要求较高的可用过虑除菌或间歇灭菌。  高温灭菌（磷酸盐、碳酸盐与钙、镁铁离子）易产生沉淀的需加入螯合剂EDTA(乙二胺四乙酸) 对于不同种类的培养基、内含不同杂菌的器具和场所等应当采用不同的灭菌方法。 配制培养基的原则 1.选择适宜的营养物质 2.营养物质的浓度及配比合适 3.控制培养基的PH值 4.原料来源的选择 5.选择适宜的灭菌处理方法 二、培养基的种类及应用 1.分类原因 (1)微生物种类不同，需要的营养物质不同。 (2)同一种微生物，培养或研究目的不同，配制的培养基也不同。 2.分类角度 按组成成分分：合成、天然、半合成培养基 按物理状态分：固体、半固体、液体培养基。 按功能分：基础、选择、加富、鉴别培养基。 按照培养微生物的种类分：细菌、霉菌、酵母菌、放线菌培养基。 3.半合成培养基 即有天然有机物，又有已知成分化学药品的培养基。 　　在天然培养基的基础上适当加入无机盐类或在合成培养基的基础上添加某些有机物。 如马铃薯蔗糖培养基。 马铃薯蔗糖培养基成分: 去皮马铃薯200克，葡萄糖20克，水1000mL. 　 优点：有效地满足微生物对营养物质的要求，适合大多数微生物。 应用：生产上、实验室 2.半固体培养基 在液体培养基中加入少量凝固剂,使之呈柔软的糨糊状或直接将营养物质配制成半流体状态的培养基。 凝固剂加量：0.2 % ～0.7%的琼脂。 应用:观察细菌的运动特征(有无鞭毛)、培养微好氧细菌，检验噬菌体。 小曲白酒-边糖化边发酵、酱油-高盐稀醪发酵 3.液体培养基 把各种营养物质都溶解于水中，混合制成的液体状态的培养基。 培养基中不加任何凝固剂。通过振荡和搅拌增加通气量。 特点：成分均匀，便于灭菌处理、运输和监测。 应用：微生物生理生化特性研究、大规模的工业生产（啤酒、葡萄酒、乳制品生产）。 （三）按照培养基的功能分 (1)基础培养基:含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基。 用途:作为一些特殊培养基的基础成分。 细菌:牛肉膏蛋白胨培养基 霉菌:马铃薯葡萄糖琼脂培养基 酵母菌:麦芽汁琼脂培养基 (2)选择培养基 在培养基中加入某些化学药品以抑制不需要的微生物生长，而促进需要的微生物生长的培养基。 化学药品---抑菌剂和杀菌剂 常用染色剂（结晶紫、亮绿、孟加拉红）或抗生素（青霉素、链霉素）. 分离革兰氏阴性菌--加青霉素或结晶紫(抑制G+). 分离酵母菌和霉菌--加抗生素(青霉素、链霉素，抑制细菌和放线菌)。 用途:将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。 (3)加富培养基 在基础培养基里专门加入待分离微生物特别需要 的营养物质，而使待分离微生物达到选择的目的。 如：血清、血液、动植物组织液、酵母浸膏等。 用途： 培养营养要求比较苛刻的异养微生物。 富集或分离某种微生物。 纤维素-富集纤维素降解微生物 石蜡油--富集分解石油的微生物 与选择培养基区别： 加富培养基：增加所要分离的微生物数量，成为优势菌，逐步淘汰其他微生物。 选择培养基：抑制不需要微