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单宁酶、β-葡糖苷酶的共固定化及其在茶饮料加工中的应用研究.pdf
摘 要
本文对单宁酶和B一葡萄糖苷酶进行了共固定化,旨在应用于茶饮料生产中发挥
除混与增香之双重功效,从而为纯茶风味茶饮料的生产奠定基础。
选取海藻酸钠和壳聚糖为载体,采用四种方法对单宁酶和8一葡萄糖苷酶进行了
共固定化。研究结果表明以海藻酸钠为载体,采用交联.包埋一交联的共固定化方法
可以获得较高的酶活力回收率。
以海藻酸钠为载体,采用交联.包埋.交联的共固定化方法,对共固定化条件进
行了优化,得到了最佳共圃定化条件:各取单宁酶和B一葡萄糖苷酶酶液2.5
ml,按
O.75:l(v/v)加入3.0%的海藻酸钠溶液6.7
ml,充分混匀后加2.5%的戊二醛使其
在溶液中的最终浓度达到1.25%,振荡O.5
h后,于20℃静簧交联4h。用5号针头
h,滤出小球体。于lO℃条件下,O.075%戊二醛溶液中交联3h,滤出小球体,用
缓冲液冲洗,予冰箱内吸干水分得共固定化酶。采用最优共固定化条件可使单宁酶
和B.葡萄糖苷酶的活力回收率分别达67.3%和46.0%。
研究了共固定化后单宁酶和B.葡萄糖苷酶的理化性质,结果显示两种酶的最适
温度均较液酶下降了10℃,分别为35℃和45℃;最适pH均与液酶相同,分别为
5.0和6.O;共固定化后两种酶对热、酸碱、化学试剂的稳定性和贮藏稳定性都有显
著提高;共固定化B-葡萄糖苷酶的表观K。=1.97x10一mol/L,比液酶低,而共固定
104
mol/L,比液酶高。
化单宁酶的表观K。=11.6X
将共固定化酶应用于茶饮料的除混和增香,研究结果表明,经共固定化酶处理
后,绿茶、红茶、乌龙茶三类茶的香精油总量均有所增加,其中以绿茶的香精油总
量增加最多,增长率达20.69%,乌龙茶和红茶分别为10.30%,6.79%。经共固定
化酶处理后三类茶的非酯型儿茶素含量增加,增幅依次为绿茶(52.17%)红茶
(20.0%)乌龙茶(16.68%)红茶(5.04%)。
绿茶饮料的抗沉淀研究结果显示,未经共固定化酶处理的绿茶饮料低温时的浊
度比经共固定化酶处理的要高:经三个月贮藏经共固定化酶处理绿茶的澄清度一直
很高,未经共固定化酶处理的绿茶在60天后有少许沉淀产生。
关键词:茶饮料单宁酶B.葡萄糖苷酶共固定化除混增香
Abstract
tOCO—immobilizeand at
This attempted tarmase
paper
intea toattainthedoubleefficaciesof andaroma-
applyingbeverage haziness--removing
the forthe
establishedfoundation tea
increasing,thus processingofpurebeverage.
of sodiumand four
tWOkinds chitosan,and
Choosing carriers,alginate inspecting
of
difierentkindsofCO—immobilizedmethods.theresultsshowedthatthebesteffectCO—
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