茶树花多糖的提、纯化、结构鉴定及生物活性的研究.pdf

摘要 茶树花富含营养成分和活性物质，是一类具重要的潜在资源。本文在系统研究茶叶多糖分离纯 化、理化性质和一级结构的基础上，利用生物大分子研究的近代最新技术和现代分离、分析手段与 药理实验方法，表征茶树花多糖的溶液行为和三维链构象，尝试揭示多糖的高级结构与其重要生物 活性的关系。 茶树花多糖的提取主要包括茶树花多糖提取条件的优化和茶树花多糖脱蛋白，脱色等方法的选 择。采用单因素实验和Box—Behnken中心组合设计实验，确定了热水提取茶树花多糖最佳提取条件： 白率和多糖保留量，确定了以Sevag法作为茶树花多糖脱蛋白的方法。实验还比较了活性炭吸附法， №氧化法和溶剂洗涤法的脱色效果，活性炭吸附法能够得到较高的脱色率和多糖保留量。经 Sephadex 量为83．6％和87．9％，蛋白含量为1．5％和2．鳊，糖醛酸含量为2．7％和7．1％。 和TFP-2是水溶性、非淀粉、非酚类物质，不含还原糖和核酸、含有蛋白质的多糖。13一消去反应 具有典型的糖类化合物的光谱特征，TFP-I同时含有a一吡喃环以及p一吡喃环的特征吸收峰，而 TFP一2只含有a一吡喃环的特征吸收峰。1H —D-Xylp和Q巾-G1c蒯Ac残基。 lI 原子力显微镜(AFM的图像显示，茶树花多糖链分子间互相缠绕，在浓度为5 g／BL下TFP-I u 和TFP一2直径为250nto和150hm，在浓度为20 NaCI水溶液中呈现球状构象，且分枝较多。pH值、温度、离子强度等环境因素的改变均影响其立 闻结构和溶液行为将明显影响多糖的生物活性。 系统的研究了茶树花多糖的体外和体外抗氧化活性。通过比较茶树花粗多糖TFP及组分TFP—l 和TFP-2对羟基自由基，超氧阴离子自由基以及DPPH自由基的清除活性，得出抗氧化活性 平，并且抑制MI)A含量的升高。 二硝基甲苯诱导的小鼠迟发型超敏反应也有显著的增强。对S180肉瘤小鼠的研究发现，灌胃TFP 活性。 茶树花多糖对四氧嘧啶引起的小鼠实验性糖尿病有明显的防治作用。灌胃茶树花多糖(75、150 和300mg／kg)21d后，能明显改善糖尿病小鼠的“三多一少”状况，显著降低四氧嘧啶诱导的糖尿 病小鼠的血糖(pO．01)。茶树花多糖在体外可以抑制a一淀粉酶和Q一葡萄糖苷酶活性，在O．2～ 2．Omg／mL浓度范围内呈量效关系。 关键词：茶树花多糖，分离，纯化，分子构象，抗氧化，抗肿瘤，免疫调节，降血糖 Abstract Tea(Camellia isrichin sinensis)flowernutritional andactive components this substances，frompoint，teaflowerasakindof resourceswhichhas potential important ication appl values．The and physicochemic8l thechemicalstructureoftea properties flower its polysaccharide(TFP)andfractions(TFP-IandTFP-2)werein studiedthis doctoraldissertation．The solutionbehaviorand