草莓耐寒性状分标记分析.pdf

JIIIIIJI IIIIIII1111111111 IIll111I Y2753962 摘要 ananassaDuch．)属蔷薇科草莓属，是我国普遍栽培的兼具高营养 草莓(Fragaria 价值和经济价值的水果。在实际栽培中，特别是北方严寒季节，设施结构一般相对简 单，低温是影响草莓产量和品质的主要因素之一。本试验以合肥地区主栽草莓10个 品种的叶片为试材，进行0℃，．2℃，．40C，．6℃，．8℃，5个温度梯度的低温处理， 计算出10个草莓材料的半致死温度(LTs0)，然后与冷害指数作相关分析，确定各个 草莓品种耐寒能力的强弱；运用单因素试验设计方法，对影响草莓SRAP反应体系的 DNA聚合酶、引物浓度以及模板DNA浓度和退火温度等因素进 M92+、dNTPs、Taq 行优化，建立适宜草莓SRAP．PCR反应体系；从110对引物中筛选出55对多态性好、 条带清晰稳定的引物对，对其进行统计分析、构建聚类树型图，对与草莓耐寒相关的 SRAP标记作初步研究，为草莓选育耐寒品种奠定基础。本试验获得的主要结果如下： (1)不同低温胁迫下，各个草莓品种的电解质渗透率均随着温度降低而增大，处 理温度与电解质渗透率之间呈负相关。依据半致死温度的大小对10个草莓品种的耐 寒性进行排序，得出：“丰香”“红颜”“雪妹”“二码沃”“佐贺清香”“宁 丰”“法兰地”“枥乙女”“京承香”“章姬”，且各个品种的半致死温度依次 ．1．70℃。 (2)冷害指数统计得出，10个品种的冷害指数在50％～90％之间，与半致死温度 作相关分析，得出相关系数为0．735，达显著水平。 基本在1．7·2．0之间，琼脂糖电泳检测结果也表明提取的DNA纯度较好，无明显蛋白 质等污染。 0xPCRbuffer 20m的反应体系中含1 29l， 0．3mmol／L，正反 M92+2．0mmol／L，dNTPs 向引物各为0．69mol／L，TaqDNA聚合酶1．0U，模板DNA为100ng。 (5)从110对SRAP引物筛选出条带丰富清晰、多态性较好的引物对共55对， 占总引物对的50％。共扩增出311条多态性条带，平均多态率为73．43％。多态性信 10个草莓品种可分为3个大类，其中耐寒性最弱的“章姬”单独聚成一类，而耐寒 性较强的“丰香”、“雪妹”等聚在第三大类的第一亚类中，说明运用SRAP分子标记 可以对草莓耐寒性研究提供一定的参考作用。 关键词：草莓，耐寒性，SRAP，体系优化，聚类分析 万方数据 Abstract ananassa toRosaceae Strawberry(Fragaria Duch．)，belongs Fragaria，is widely cultivatedwith nutritionalandeconomicvalueinour high country．Low isone