草坪草耐热基因隆和耐旱基因筛选.pdf

摘 要 干旱与热是植物生长的非生物胁迫两种主要因素，植物新陈代谢将因此发生 变化，生理活动受到阻碍出现萎蔫。因此它们严重影响了植物的生长，成为现代 农业发展和城市绿化的严重制约因素。研究植物抗逆的分子生物学机制，通过基 因工程改良物种对干旱或着高温的耐受性，是解决这些非生物胁迫对现代农业发 展和城市绿化制约的有效方法。 AsEXPl基因是从极端耐热型草种A．scabra中分离的到扩展蛋白基因，在高 温胁迫下大量表达。实验证明该基因与A．scabra的耐热品质密切相关，是耐热 基因。本实验是从草坪草的另一耐热植物翦股颖”PennA．4”基因组中通过基因组 步移的方法克隆到AsEXPl基因全长，全长2．6kb左右包括启动子、三个编码区、 两个内含子及3’非翻译区。两个内含子分别位于+136～+244(以翻译起始位点 基组成。AsEXPJ基因5’．非编码区包括启动子部分约1．0kb的DNA片段，通过 别应答元件。这暗示该基因在抗热翦股颖中的表达很可能与ABA、GA的调控有 着密切的关系。RT-PCR实验初步证实该基因受ABA、GA的调控。 为了研究草坪草狗牙根耐旱的分子机制，本实验通过抑制性消减杂交建立 比较两品种间旱诱导上调表达基因的差异，并通过半定量RT-PCR确定Ti舳ay 中与耐旱密切相关的基因。实验结果表明：与植物蜡质合成密切相关的CERl基 因，与消除氧自由基密切相关的SOD，glutathioneperoxidase，2-Cys 上述基因在Tifway中的表达量远高于C299。此结果显示了Ti如ay主要从消除 氧自由基及减少水份散失等多个方面应对旱的胁迫。这些基因可作为耐旱分子标 记的候选基因筛选更多的耐旱品种，也可以在克隆到基因全长后转化到农作物或 草坪植物中提高它们的耐旱品质，克服干旱和高温对农业生产和城市绿化的影 响。 关键词：草坪草；耐热基因；耐旱基因；抑制性消减杂交 Abstract stress Heatand aretwoabioticstress(acters theseabiotic drought affectingplants’growth．In is the of pattern activityinhibited,allstages conditions，#ants’metabolismchanges，physical isaffectedand tobe thetoleranceof growth appearswilting．Improving speciesbygenetic isaneffectivemethodtosolvethe and in engineering problemlimitingplantgrowthproduction areas· many AsEXPlisan isolatedfromextremeheat-resistantA．scabrawhich expansingene species in AsEXPlbeinvolvedin that conditions．Experimentsmay expresseshightemperature suggest was heat-tolerant