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轮状病毒腹泻婴肠道微生态变化的研究
目 录
目 录
摘要…………………………………………………………………………………………………………………………．．I
英文摘要…………………………………………………………………………………………II
1引言…………………………………………………………………………………………．1
1．1轮状病毒感染腹泻的研究进展……………………………………………………………l
1．1．1轮状病毒概述…………………………………………………………………………l
1．1．2致病机理……………………………………………………………………………．1
1．1．3临床症状……………………………………………………………………………．2
1．2婴儿肠道微生物研究概述………………………………………………………………．2
1．2．1婴儿肠道微生物的分布与组成………………………………………………………2
1．2．2婴儿肠道微生物的主要功能…………………………………………………………5
1．3微生物分子生态学主要技术简介………………………………………………………．．7
l-3．1
16S
rRNA基因序列分析原理………………………………………………………。7
1．3．2目的基因的PCR扩增……………………………………………………………………………………．8
1．3．3变性梯度凝胶电泳技术………………………………………………………………8
1．4课题来源………………………………………………………………………………．．10
1．5本研究的目的与意义……………………………………………………………………10
2材料与方法…………………………………………………………………………………．1l
2．I试验材料………………………………………………………………………………．．1l
2．1．1研究对象个体情况…………………………………………………………………．1l
2．1．2主要试剂……………………………………………………………………………．11
2．1．3仪器与设备…………………………………………………………………………．．12
2．2试验方法………………………………………………………………………………．．12
2．2．1粪便样本总DNA的提取…………………………………………………………．．12
2．2．2
2．2．3
RV感染腹泻婴儿乳酸杆菌属专一片段PCR扩增及DGGE分析…………………．15
2．2．4RV感染腹泻婴儿双歧杆菌属专一片段PCR扩增及DGGE分析…………………16
2．2．5RV感染腹泻婴儿DGGE条带测序分析……………………………………………l7
2．2．6数据分析……………………………………………………………………………17
8
3结果与分析…………………………………………………………………………………．1
3．1调查结果统计……………………………………………………………………………18
3．2RV感染腹泻婴儿肠道菌群的多样性……………………………………………………19
6SrDNA
3．2．1RV感染腹泻婴儿1 V3区PCR扩增……………………………………．．19
3．2．2
RV感染腹泻婴儿肠道菌群的多样性分析…………………………………………．19
东北农业大学工学硕士学位论文
3．3RV感染腹泻婴儿肠道优势菌群分析……………………………………………………22
3．3．1
RV感染腹泻婴儿DGGE优势条带的测序分析……………………………………22
3．3．2
RV感染腹泻婴儿DGGE优势条带的定量分析……………………………………24
3．3．3
RV感染腹泻婴儿肠道优势菌群组成分析…………………………………………24
3．4RV感染腹泻婴儿肠道乳酸杆菌属的分析………………………………………
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