利用小孢子培养诱变技术改良甘蓝型油菜cms恢复系.pdfVIP

利f『】小他r培养和诱坐技术改良蓝型汕菜CMS恢复系 摘要 油菜在我国是继稻、麦、玉米、大豆之后的第五大作物，栽培面积和总产量均 居世界首位，在农业经济中占有重要地位。油菜油是我国第一大食用植物油，占我 国食用油的60％。油菜油由于不饱和脂肪酸(主要是油酸)含量高，饱和脂肪酸含 量低，是世界公认的最健康的食用植物油之一。目前我国推广的双低油菜品种中普 遍存在油酸含量偏低、亚麻酸含量偏高的问题，由于缺乏相应的种质材料，尤其是 for 低亚麻酸材料，使得油莱高油酸低亚麻酸品质育种(Breeding 缓慢。现代生物技术与传统的诱变技术结合进行种质创新以拓宽品质改良的种质基 础、加快育种进程是解决这一问题的重要方法。 和轮31为实验材料，通过小孢子培养技术、单倍体离体辐射诱变、种子辐射诱变以 及单倍体幼胚化学诱变等技术，结合AFLP分子标记技术和脂肪酸成分分析，初步 探索了油菜恢复系改良的新途径。主要结果如下： 1 小孢子培养及后代的脂肪酸成分分析和抗病性鉴定 体，其群体大小分别为68个和57个株系。 1．2 DH群体的脂肪酸成分分析，结果表明：两群体中各脂肪酸含量变异系数 均较小：在两个群体中各找到了3个油酸+亚油酸含量大于85％的DH株系。 1-3终花期核盘菌牙签接种DH群体鉴定菌核病抗性，结果显示：两群体抗病 照相比，1815中个别株系的抗病性有显著提高。 1．4 DH群体AFLP分析表明两个DH群体内的基因型差异较小。 1．5本实验结果表明：小孢子培养可在保持原有品系的某些优良性状的基础上 使基因型迅速纯合，并在后代中可筛选到脂肪酸成分和抗病性得到改良的株系。 2利用诱变技术改良油菜CMS恢复系 2．1 单倍体试管苗离体器官叶柄、根和幼茎中，以幼茎在附加有0．5mg／L 2，4一D和2 mg／L 组织的辐射诱变剂量在O．774C／Kg--1．032C／Kg较适宜：对愈伤组织诱变后获得 10个单株中扩增出43条差异带。 2．2利用25．8 辐射性最强；辐射处理对供试油菜的种子发芽率影响较小：谷2．1和谷2．2的M，种 毕中农业人学2004厢顺l。学位论义 子脂肪酸成分分析表明：辐射诱变处理对芥酸含量的影响较大，而对油酸、亚油酸 和亚麻酸含量的影响较小。 2．3 EMS(甲基磺酸乙酯)对小孢予来源的单倍体幼Hl!进行诱变处理的最佳浓 度为0．1％．0．2％，浓度为0．1％时虽佳处理时间为90 济；EMS诱变处理对油酸和亚油酸含量的影响较大，其中找到了油酸含量高达68．62％ 的材料。 2．4三种诱变方法比较表明：种子诱变前期工作简单，但后期筛选麻烦、工作 量大；单倍体离体诱变能提高变异频率并在短时间内获得纯合变异体，但技术含量 高，前期室内培养耗费多；单倍体幼胚的诱变对一些出胚率高的材料比较适宜，无 论室内还是罔间的工作量都不大，而且纯合所需的时间短，这种方法显著优越于前 两者。 关键词：甘蓝型油菜；CMS恢复系；小孢子培养；辐射诱变：化学诱变；脂肪 酸；AFLP 利用小她了培养干n西叟挫术改良||蔬型油菜CMS恢复系 ABSTRACT isthefifth besidesricewheatmaizeand inChina，its Rapeseed crop soybean cultivatedareaandtotal bothrankthefirstinthe an world，which output play roleinthe oilisthemost edible oil agriculturaleconomy，Rapeseedimp