大白菜雄性核不的细胞学观察及基因定位和aflp分子标记.pdfVIP

摘 要 基因定位是遗传研究的重点内容,也是育种工作的重要基础。植物雄性不育 基因是有用的基因资源，在作物杂交育种、特别是在杂种优势利用育种中占有 十分重要的地位。因此，阐明植物雄性不育性的细胞学基础，特别是明确其雄 性不育基因所位于的染色体及其与之紧密连锁的分子标记，必将有助于作物雄 性不育性深入研究和应用。 本研究以大白菜雄性不育两用系‘大阳 AB 系’和大白菜系列初级三体为材 料，采用石蜡切片、三体遗传分析及分子标记等方法技术，研究了大白菜雄性 不育系的花粉败育过程，对决定大白菜雄性不育性的核基因（ms ）进行了染色 体定位和 AFLP 分子标记筛选，主要结果如下：（1）‘大阳 AB 系’雄性核不育系 的花药发育受阻于四分体发育期，败育的特点为四分体发育异常，不能正常释 放小孢子，败育的细胞学原因是绒毡层细胞过度肥大生长，导致营养和能量供 需失调，致使小孢子不能正常形成、花粉完全败育。（2 ）在雄性不育系与不同 初级三体杂交的 F2 和 Tc 子代中，只有雄性不育系×Tri-4 组合的育性分离比例（可 育株:不育株）表现异常，分别为 15.5:1 （F ）和 3.24:1 （Tc ）,严重偏离孟德尔 2 的 3:1 和 1:1 的分离规律，其它组合的分离比例变动在 2.60:1～3.76:1 和 0.81:1～ 1.48:1，均符合孟德尔的分离规律，由此表明大白菜雄性核不育的遗传仅与三体 -4 有关，亦即决定大白菜雄性不育的核基因（ms ）位于其第4 号染色体上。（3 ） 基于染色体和染色单体两种分离方式进一步分析证明，该雄性核不育基因位于 4 号染色体上距着丝点较近的位置。（4 ）通过对 124 对 AFLP 引物组合的筛选， 初步获得了一个与大白菜雄性核不育位点紧密连锁的 AFLP 标记 E34M49 ，该标 记与育性基因的遗传距离为 1.2cM，片断长度为 398bp 。 关键词：大白菜；初级三体；雄性不育；基因定位；AFLP 标记 Cytological Observation, Gene Location and AFLP Marker Screening of Male Sterility in Chinese cabbage Author: Yuan He Major: Olericulture Tutor: Zhang Cheng-he (College of Horticulture, Agricultural University of Hebei, Baoding 071001, China) Abstract Chromosome localization of genes is an important work for genetic study and breeding practice. In this paper, ‘Dayang AB line’and a set of trisomics of Chinese cabbage were used as materials. The pollen abortion process of sterile line(A line) was observed by paraffin slice techniques, the location of the gene controlling the male sterility was carried out by primary trisomics analysis, and the molecular markers linked to the male sterile gene was screened b