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大豆gmubi马铃薯patatin2启动子在芥菜中的表达分析
目录
摘要…………………………………………………………………………………………………………III
ABSTRACT……………………………………………………………………………………………………．V
第一章文献综述………………………………………………………………………l
1．1高等植物启动子简介……………………………………………………………．1
1．2启动子的一般结构特征…………………………………………………………．1
1．3高等植物启动子的分类…………………………………………………………．2
1．3．1组成型启动子………………………………………………………………．2
1．3．2特异性启动子………………………………………………………………．．3
1．3．3诱导型启动子………………………………………………………………．5
1．4高等植物启动子的克隆方法……………………………………………………．6
1．4．1利用启动子探针质粒载体筛选启动子……………………………………．．6
1．4．2利用PCR技术克隆启动子…………………………………………………7
1．5启动子的功能验证………………………………………………………………．7
1．5．1生物信息学研究方法研究启动子…………………………………………．．7
1．5．2实验方法研究启动子………………………………………………………一8
1．6Gmubi启动子……………………………………………………………………．8
1．7
Patatin2启动子…………………………………………………………………一9
第二章引言…………………………………………………………………………一11
2．1研究的目的与意义………………………………………………………………11
2．2研究内容…………………………………………………………………………12
2．2．1
2．2．2
2．2．3农杆菌介导法获得转基因芥菜……………………………………………12
2．2．4转基因芥菜植株的GUS组织化学分析…………………………………．．12
第三章材料与方法…………………………………………………………………．．13
3．1材料………………………………………………………………………………………………………．13
3．1．1实验材料……………………………………………………………………13
3．1．2试剂与药品…………………………………………………………………13
3．1．3主要缓冲液…………………………………………………………………13
3．1．4细菌培养基…………………………………………………………………13
3．1．5主要仪器设备………………………………………………………………14
3．1．6主要引物……………………………………………………………………14
西南大学硕士学位论文
3．2实验方法…………………………………………………………………………15
3．2．1马铃薯基因组DNA及大豆基因组DNA的获得………………………．．15
3．2．2植物表达载体的构建………………………………………………………．15
3．2．3质粒转化农杆菌……………………………………………………………17
3．2．4转基因芥菜的获得…………………………………………………………．18
8
3．2．5转基因植株的PCR鉴定……………………………………………………1
3．2．6转基因植株的GUS表达分析……………………………………………．．19
第四章结果与分析……………………………………………………………………21
4．1Gmubi启动子的克隆及含报告基因的载体的构建……………………………2l
4．2Patatin2启动子的克隆及含报告基因的载体的构建…………………………．24
4．2转基因芥菜的获得及鉴定………………………………………………………27
4．2．1农杆菌介导的芥菜下胚轴遗传转化………………………………………27
4．2．2转基因芥菜植株的PCR鉴定……………………………………………．．28
4．3转基因芥菜植株的GUS表达分析…………
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