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儿茶素对黑色素形成抑制效果初探 茶学专业硕士研究生官兴丽 指导教师 曾亮副教授 摘要 儿茶素是2．苯基苯并吡喃的衍生物，属于黄烷醇类化合物。它大量存在于茶树新稍中， 占茶叶干重的12％-24％，是多酚类的主要成分，约为总量的70％．80％。根据结构不同，儿茶 没食子酸酯(EGCG)。由于结构中具有连或邻苯酚基，儿茶素具有良好的抗氧化能力，其相同 或分布不均会造成皮肤局部过黑及色素沉着，从而产生雀斑、老年斑、黑斑病等病症，影响 美观。酪氨酸酶0zc,1．14．18．1)又称多酚氧化酶，是一种铜蛋白，其活性中心的双核铜离子在酶 催化中起重要作用，是黑色素生成的关键酶。随着化妆品及药品行业的发展，天然产物化妆 品及药品顺应了回归大自然的发展潮流和人们的消费需求，将成为化妆品及药品开发中的主 题。 本文初步探讨儿茶素对黑色素形成的影响，包括儿茶素对马铃薯酪氨酸酶活性的抑制作 用；儿茶素对蘑菇酪氨酸酶活性的抑制作用；EGCG对B16小鼠黑素瘤细胞的形态、细胞增 殖率、酪氨酸酶活性及黑色素生成量的影响。取得结果如下： 一、采用分光光度计法测定酶液加入量、底物浓度、温度、pH值对酶活力的影响，确定 最适反应条件。在30℃、pH 儿茶素对马铃薯酪氨酸酶的抑制效应。结果表明：反应最适条件为酶液加入量0．5mL、底物 浓度2mmoFL、温度30℃、pH6．8。儿茶素对马铃薯酪氨酸酶有抑制作用，抑制率达到50％ 的儿茶素质量浓度0C50)约为O．27 抑制作用表现为竞争型抑制，抑制常数(隔)为O．16mj蜘L。 二、在30℃，pH 素对蘑菇酪氨酸酶单酚酶和二酚酶的抑制效应。结果表明，儿茶素对酪氨酸酶单酚酶和二酚 mg／mL和1．13 酶均有抑制作用，其半数抑制浓度0c50)约分别为O．89 图显示儿茶素对二酚酶的抑制作用表现为竞争型抑制，抑制常数(娲)为O．53mg／mL。 细胞增殖率的影响，L广多巴氧化法测定EGCG对B16细胞酪氨酸酶活力的影响，氢氧化钠裂 解法测定EGCG对B16细胞黑色素生成量的影响。结果表明：EGCG作用24h，高浓度 h，高浓度组大部分细胞死亡。EGCG对B16 (609M)组细胞胞膜融合现象明显；作用72 细胞增殖率、酪氨酸酶活性、黑色素生成量均有显著抑制，呈明显的剂量效应关系；且EGCG 抑制B16细胞增殖，ICso为33．99／,tM。 以上研究表明，几茶素具有抑制体外酪氨酸酶的作用，表现为竞争型抑制；EGCG能够显 著抑制B16细胞形态、细胞增殖率、酪氨酸酶活性及黑色素生成量。儿茶素对抑制黑色素形 成有一定作用，有望开发成为化妆品及药品。 关键词：儿茶素EGCG黑色素酪氨酸酶B16小鼠黑素瘤细胞 Ⅱ EffectofCatechinsonthe Inhibitory FormationofMelanin Candidate：Guan TeaScience，Master Xingli froL zenRLiang Supervisor：ViceeciVgProf．Z(gnaiL ABSTRACT Catechinsage derivatives，theofflavan01．Thenumbers 2一phenylbenzopyran compound large is ofcatechinsareinthenewshootoftea content12％tO24