棉纤维细胞分化发育功能基因的研究.pdfVIP

摘 要 纤维)为材料．比较了正常棉与无絮突变体胚珠内控制纤维细胞突起相关酶活性的变化，以及正 常纤维与极短纤维细胞内的可溶性糖、苹果酸、相关酶及其基因表达等方面的变化．研究了纤维 细胞突起、仲长和纤维素台成的相关因素，探讨了棉纤维分化与发育的相关机理。研究主要包括 以下几个方面： 一、棉纤维细胞RNA提取方法的比较研究 J为高质量提取棉花纤维细胞的RNA，进行了三种提取方法的比较研究。研究表明，用高离子、 度．并加入PVP和巯基乙醇两种抗氧化剂。用本方法提取的棉花纤维等组织细胞的RNA，纯度高． 2 44 09．平均得率为1mg gI{，不降解，酶切完全，适合于一般DNA分子操作的酶学反应y 二、蔗糖合成酶对纤维细胞突起、伸长和纤维素合成的作用 05％、68．1J％及15484％； 蔗掰合成酶活性，与开花前1天(．IDPA)胚珠比较，分别升高了169 胚珠的酶活性均比其它材料高，并在2DPA达到峰值．无絮突变体酶活性仍处较低水平且变化不 大。蔗糖合成酶的功能之一是摧化蔗糖为果糖和UDPG，果糖和UDPG可为纤维细胞突起提供能 量和物质。因此，蔗糖合成酶活性的高低可能直接影响到纤维细胞的突起。 在】0～30DPA，蔗糖合成酶在各组织细胞中的活性高低为：纤维细胞种皮细胞胚细胞．与 值，其余四个材料在20DPA有个峰值，这与它们次生壁开始增厚时间相～致。在30DPA以后． 除了胚细胞外．纤维和种皮细胞中的蔗糖合成酶活性部急剧上升．而纤维和种皮细胞内的纤维索 含量也在此时期升高，胚细胞内的纤维索含量比较低。由此可知蔗糖合成酶与纤维紊的合成相· 敛。y／ =i、蔗糖酶对纤维细胞初始伸长的调节作用 海岛棉PimaS．4。町见，蔗糖酶是在纤维细胞初始伸长期大量表达的．它的活性高低可能影响纤 在胚或种皮细胞中可能存在着某种抑制蔗糖酶活性的物质，以至在胚珠发育前期 能到都 俭蔗不 测糖襄 到酶达 ㈣矽 四、可溶性糖和苹果酸对纤维细胞的突起、伸长及纤维索合成的作用 ， 08％、 21493％、200 18％。在 07％：而光子棉胚珠仅上升了3727％，无絮突变体胚珠反而下降了35 379倍、542倍、6 在10DPA均达最高值，分别是40DPA的9 1143％和16．73％。无絮突变体胚和种皮细胞可 溶性糖含量分别比徐州142和海岛棉PimaS．4低r 溶性糖含量在10-．-40DPA呈下降趋势，且远远低于纤维细胞内的含量。差异显著性分析结果表明， 在ODPA各材料之间无显著性差异，在5DPA无絮突变体与其他4个材料胚珠内的可溶性糖含量 差异达到极显著水平。可见液泡中由可溶性糖引起的膨压对纤维细胞的突起影响不大，但对纤维 细胞的初始伸长影响很大。 显著性差异，但无絮胚珠中的苹果酸含量高于徐州142正常棉，可见由苹果酸引起的膨压对纤维 细胞的突起影响不大．但对纤维细胞的初始伸长可能存在着影响。在IO一30DPA，各纤维细胞中 苹果酸含量变化幅度不大，随后急剧上升。经显著性分析，徐州142正常棉与Ligon棉纤维细胞 都己停止伸长．纤维素却大量合成，因此．苹果酸可能对纤维素的合成起很大的影响作用。无絮 突变体种皮细胞内苹果酸含量一直都很低．而胚细胞内苹果酸含量高于种皮细胞，但仍低于纤维 细胞。由此可得苹果酸对纤维细胞纤维素合成所起的作用大于对种皮或胚细胞物质合成所起的作 用。／ 五、PEPCase对纤维细胞的伸长具有调节作用 ， 的功能足佻化PEP和HCO，‘羧化形成草酰乙酸，草酰乙酸再在苹果酸脱氢酶的作用下合成苹果酸。 的苹聚酸．以供纤维细胞生长、发育、纤维索合成和胚细胞的生长发育。， ， 六、木葡聚糖转移酶基因可能是控制纤维伸长的关键性基因 (术箭聚糖转移酶足一种细胞