棉花(gosspium hirsutum l.)蓝铜类蛋白基因的克隆及表达分析.pdfVIP

摘要 棉花是世界上最重要的经济作物之一，同时，棉花纤维也是世界上重要的纺织原料之一。棉花 在我国的国名经济中占有重要的地位。为提高我国原棉在国际市场上的竞争力，急需对我国原棉的 品质进行改良，以适应国内及国外市场的需求。 棉纤维是由棉花胚珠外珠被表皮层的单细胞发育而成，其发育过程大致可分为4个阶段：棉花 纤维的起始、棉花纤维的伸长、次生壁的增厚和脱水成熟。棉纤维发育过程中有大量的基因，分离、 鉴定纤维发育相关基因不仅可以理解纤维发育的分子机理，还可以为利用基因工程改良纤维品质提 供了目的基因。 增技术克隆到全长为721 bp，编码176个氨基酸，分子量 bp的eDNA序列，开放阅读框长度为528 为17．99kD。NCBICDS分析发现该基因的氨基酸序列在35～115勰处是1个质体蓝素类的保守区 Bank中找到一个5’端不完整的棉花蓝铜EST 域；(2)GhBCP2(GenBank登录号：FJ495087)，从Gene 序列，以新陆早13号为材料，利用eDNA末端快速扩增技术克隆到全长692 t,p的eDNA序列，开 放阅读框长度为519 l①。NCBICDS分析发现该基因的氨 bp，编码173个氨基酸，分子量为18．68 基酸序列在36-1 从Gene 端快速扩增技术到全长634 bp，编码171个氨基酸，分子 bp的eDNA序列，开放阅读框长度为513 kD。NCBI 量为18．95 CDS分析发现该基因的氨基酸序列在36～116aa处是1个质体蓝素类的保守 区域。 利用实时荧光定量PCR技术对不同器官(组织)来源的RNA进行分析，从表达特征来看， GhBCPl在根、茎、叶中不表达，在花中少量表达，在胚珠和纤维细胞中表达，并在开花后6-18天 的纤维中持续高效表达，18天后减弱，是一个棉纤维优势表达基因；GhBCP2在根中不表达，在茎、 叶、花、胚珠和纤维细胞中表达，在开花后第9天的纤维中表达开始减弱；GhBCP3在茎中不表达， 在根、叶、花、胚珠和纤维细胞中表达，在开花后3-9天的纤维中持续高效表达，9天后减弱，是 一个棉纤维优势表达基冈。 这些研究为揭示棉纤维发育机理和纤维品质的分子改良打下了基础。 关键词：棉花，蓝铜类蛋白，GhBCPl基因，GhBCP2基因，GhBCP3基因，纤维发育 ABSTRACT materialsandisoneof texitle inthe fiberisoneofthemost textile word．，cotton important important an inournational orderto oBrrawcoRon。 material．Cotton playsimportantpart economy．1n improve inthe mustincreaserawcoRon’S world，we competition quality． Cottonfiberis froma ovule cellandit’S consistsoffour elongatedsingle epidermid development aa-ea