棉铃虫对bt毒cry1ac抗性的分子遗传机理研究.pdfVIP

棉铃虫对bt毒cry1ac抗性的分子遗传机理研究.pdf

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棉铃虫对bt毒cry1ac抗性的分子遗传机理研究

) 一 目 录 中文摘要…………………………………………………………………………………………..Ⅵ 英文摘要…………………………………………………………………………………………..Ⅶ 1.前言…………………………………………………………………………………………………………………………..1 1.1文献综述………………………………………………………………………………………l 1.1.1苏云金芽孢杆菌…………………………………………………………………………l 1.1.2转Bt基冈作物的研究与应用…………………………………………………………..7 1.I.3昆虫对Bt及转基因作物的抗性现状…………………………………………………..9 1.1.4昆虫对Bt抗性稳定性的研究…………………………………………………………ll 1.1.5昆虫对Bt抗性的遗传研究……………………………………………………………12 1.1.6昆虫对Bt抗性的分子遗传机制研究…………………………………………………14 1.1.7Bt抗性治理策略的研究………………………………………………………………一16 1.1.8 AFLP分子标记技术及其在昆虫学研究中的应用…………………………………….18 1.2本论文研究目的和意义……………………………………………………………………2l 2.材料与方法………………………………………………………………………………………23 2.1试验材料……………………………………………………………………………………23 2.1.1昆虫材料………………………………………………………………………………一23 2.1.2Bt毒素………………………………………………………………………………………………………………24 2.1.3主要实验仪器及试剂……………………………………………………………………24 2.1.4主要生化试剂及缓冲液配制…………………………………………………………….24 2.2试验方法……………………………………………………………………………………26 2.2.1棉铃虫抗Bt毒素CrylAc近等基因系的建立………………………………………..26 2.2.2棉铃虫对Bt毒素CrylAc的抗性遗传分析…………………………………………一28 2.2.3棉铃虫抗Bt CrylAc毒素AFLP标记体系的建立……………………………………29 2.2.4变性聚丙烯酰胺凝胶电泳……………………………………………………………一32 2.2.5银染…………………………………………………………………………………………………………………33 2.2.6数据统计与分析………………………………………………………………………..33 2.2.7 AFLP标记的同收、克隆及序列特征…………………………………………………34 2.2.8棉铃虫对Bt毒素CrylAc抗性稳定性的初步监测…………………………………一34 3.结果与分析……………………………………………………………………………………..36 3.1棉铃虫抗Bt毒素CrylAc近等基冈系的建立…………………………………………….36 3.2棉铃虫对Bt毒素CrylAc抗性遗传分析…………………………………………………37 3.3.1基因组DNA含量及纯度测定…………………………………………………………38 3-3.2酶切.连接反应…………………………………………………………………………38 3.3.3连锁群的确定以及抗性相关检验……………………………………………………一39 3.3.4连锁图谱框架构建及定位抗性基因…………………………………………………一43 东北农业人学农学博Ij学位论文 3.3.5AFLP标记的同收、克隆及序列特征…………………………………………………44 3.3.6棉铃虫对Bt毒素CrylAc抗性稳定性的初步监测……………………………………46 4.讨{仑…………………………………………………………………………………………………………………………….48 4.1棉铃虫抗Bt近等基冈系的建立…………

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