甘蓝自交不亲和引起的蛋白质磷酸化及其相关特征研究.pdfVIP

甘蓝自交不亲和性引起的 蛋白质磷酸化及其相关特征研究 蔬菜学专藏博士研究燕昊能表 指导教师：王小住朱利泉教授 (摘 要) 自交不索和在植物界中广泛存在，引起了植物学界和分子生物学界的广泛关注，它有利 于禳纺熬遗传进纯，扩大变雾穰度，在骞秘上鸯较嵩静巍瘸蘸最。赣究涯鞠，攘耪囊交不亲 和性由S位点决定，翻前已分离出多种s一基因及其表达产物，在孢子体型自交不亲和植物中， 己姨芸薹属分离获褥多辞编疆S．整纛猿蘩自S-locus 编璐s．受体墩薅(S-receptor 酸化参与的策种信号传递有关，最终导数自身花粉生长受阻，但j蠡今为止尚朱分离出SRK的 底麟，底携的分离对滋一步弄溃自交不装和揎号传导机制，具有十分重要的意义。 oleracea 本文以自交不亲和甘蓝(BrassicaL．)为材料，全面研究了和探索性地阐述了自 花搜耪帮秀蕊援耪象转下蛋自壤磷酸纯幸#嗣及箕穰关生爨生纯特糕，分离了授耪遘程；l超鹣 磷酸化蛋白质和阻止白花花粉萌发的蛋自质，即SRK的底物，取得了如下富有新意的结果， 这塑结栗分瓣子耜互联系熬5个方囊： 1．甘蓝自交不亲和花粉萌发及其与蛋白质磷酸化的关系探讨 粉管生长的影响，以及蛋白激酶在阻止自花花粉萌发中的作用，分析了花糟萌发与骚臼质磷 酸化的关系。 结果表明，烬P、CaCl：跌疑A豫+N勘憋处理搜叁菇芯粉萌发率嚣著酶低，诧粉警艇长明显 减缀；促进辨花花粉萌发和花粉管的生长。槲皮索处理能极大地携高自花花粉蘸发率和花粉 管的糖黠长发，两对髯花拄头提取渡诱学花粉萌发和花粉管的摆对长度几乎没有影响t因此 SRK激酶对于自交不亲和的实璐是必需的。 2，自交不亲和甘蓝授粉引发花柱部分生理生化变化及其与蛋白激 酶抑制荆的关系研究 研究了壹蕊授糖萃曩异花授羚矮自燮不綮和嚣蘸菇接内熬翡镙护系统的动态交纯。结果表 起SOD和CAT活性魍对降低，两POD活性稳对舞赢，这在自花授粉中表现得更为明显。 耐用获纯毅术鞠原予吸收方法，对嚣蘸授耪过程串花柱内舀和ea”禽量动态变纯进行了 探讨。结暴发现，sl甘蘸无论是鑫花授粉还是摔稳授粉，授粉屠岔袁量璧下降趋势，在授耪 屠O—lh彦耗授耪；}起懿K+含量下降较异琵授粉抉；授粉后3h耧6 h时，叁花授羧和辩花授 粉之闻K+禽量都分剃存在极攫著差异。 h 无论自花授粉还是髯花授粉，授粉后0·l c矿+含量都迅速降低，且降低幅度随授粉时间 h和1 的延长而减小。授粉后O．5 h时自花授粉与异花攒粉花柱内Ca2+含懿分剐存在显著性差 异，授粉后较短时阔内花桂内ca2÷含髓与授粉綮和与否存在明显耜关性。 酶的关系。对自花授粉而言，3种酶的活性都因抑制剂的加入两升高，l(+、Ca：+含量略有降低{ 异花授粉却引越所有指标都略有降低。抑制剂处理后实际就是阻止自花授粉萌发的蛋白质磷 酸化受阻．阻止自花花粉萌发的机制在很大程度上被阻断。因而自花授粉后可以引起花粉萌 发．异花授粉指标略有降低，原闵可髓在于植物体内蛋白澈酶并不单一，在不同时期和不间 的生理过程中虽然某种或几种激酶占主要部分。趋主要作用，值仍育其它激酶的存在，而槲 皮索这类抑制嗣并不是专门抑制某种激酶的摊铷帮，它可能抑镧多种激酶的活性，所戳也就 抑制了体内其它反癌激酶的稀佳，导致酶活帮离子浓度静改变． 通过对花柱内蛋白含量测定袭明，自交不禁和材料的异花授粉和自花授耪后短时间内花 桂的蛋白质含量，都里现出先上升再略微下降。并迅速维持在较高的食量水平，自筏授粉后5 min。晚于自花授粉，在 rain时达到峰值，异花授粉峰值不十分明显，且出现时间在投粉聪10 10min以上自花授耢和异花授粉蟹自震含量几乎一致。 3．授粉与Ca2+定位关系研究 采用透射毫镜鼹察技术手毅纛c矿+佑学定键技零．势撂了鑫荭授耪与男藏授耪藏露ca：+ 在牲头袭皮锢熬中懿分拳清溅鞋及爱＆激酶撺制裁