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番茄mi-1基snp标记开发及种质资源的筛选
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目 录
中文摘要……………………………………………………………………………………………．I
英文摘要…………………………………………………………………………………………。Ⅲ
1弓ljii………………………………………………………………………………………………………………………………．1
1．1研究的目的意义及技术路线…………………………………………………………………1
1．1．1目的意义…………………………………………………………………………………1
1．1．2试验设计…………………………………………………………………………………2
1．2文献综述………………………………………………………………………………………3
1．2．1番茄根结线虫病研究进展………………………………………………………………3
1．2．2番茄抗线虫基因工程进展………………………………………………………………7
1．2．3分子标记研究现状……………………………………………………………………。11
1．2．4
SNP标记的研究现状…………………………………………………………………。19
2材料方法…………………………………………………………………………………………25
2．1材料………………………………………………………………………………………………………………………．25
2．1．1供试番茄材料…………………………………………………………………………．25
2．1．2病原………………………………………………………………………………………………………………。25
2．2试验方法……………………………………………………………………………………26
2．2．1病原物接种……………………………………………………………………………．．26
2．2．2番茄根结线虫病抗性鉴定………………………………………………………………26
2．2．3叶片总DNA的提取……………………………………………………………………26
2．2．4目的基因序列获取……………………………………………………………………．27
2．2．5双亲PCR产物测序和生物学信息比对………………………………………………30
2．2．6等位基因特异PCR……………………………………………………………………30
2．2．7
SNP分子标记开发以及种质资源筛选………………………………………………．32
3结果与分析………………………………………………………………………………………33
3．1病源线虫的繁殖与接种……………………………………………………………………．33
3．2遗传群体的构建和抗性鉴定………………………………………………………………33
3．2．1遗传群体的构建………………………………………………………………………．33
3．2．2抗病性鉴定结果………………………………………………………………………．33
3．3番茄DNA的提取……………………………………………………………………………34
3．4目的基因序列获取…………………………………………………………………………35
3．4．1目的基因序列的获得和扩增…………………………………………………………．．35
3．4．2双亲PCR扩增产物的凝胶回收与纯化………………………………………………36
3．4．3
PCR纯化产物的连接、转化与鉴定…………………………………………………．36
3．5双亲PCR产物测序和生物学信息比对……………………………………………………．38
东北农业火学农学硕J：学位论文
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