茶树酚类物质的物合成及关联合成酶基因的差异表达.pdfVIP

摘 要 茶树酚类物质的生物合成途径及其代谢调节是一个复杂的网络系统。茶树组织中 酚类物质的含量受到各种内部和外界因子的影响，具有发育、组织器官和诱导特异性。 本文分别以不同发育阶段、不同组织器官、不同光照处理下的茶树组织为材料，开展 了酚类物质的合成和相关基因表达差异研究。主要结果如下： 1．研究了酚类物质生物合成与积累的发育特异性。结果表明：叶片中儿茶素总 量随幼苗的发育而逐渐减少，且六种儿茶素都能检测到， 其中 EGCG 在儿茶素总量 中占的比重最高，C 比重最低；茎中儿茶素总量变化趋势及种类与叶片中基本一致； 根中儿茶素含量极低，且种类很少。叶片中只有 F3’5’H 和 DFR 基因表达规律与儿 茶素变化趋势基本一致。伴随着酯型儿茶素的消失，根中 CHI 和 F3’5’H 基因表达量 急剧下降；PAL 、C4H 基因表达与儿茶素积累的关系不密切。 2 ．酚类物质生物合成与积累具有器官组织特异性。结果表明：茶树幼苗叶片中 儿茶素总量最高且种类丰富，茎中含量呈现下降趋势，但种类没有减少，而根中只含 有极少量的非酯型儿茶素；叶片中原花青素含量最少，茎中最多。在茶树植株不同器 官中，酚类物质合成的相关基因表达差异明显，且趋势不同，与儿茶素含量变化趋势 一致的只有 CHS、CHI、 F3’5’H 基因。 茶树植株的叶、茎、根中儿茶素总量分别是愈伤组织的 1604.41、143.98 和 6.03 倍；原花青素含量分别是愈伤组织的 0.31、1.38 和 0.98 倍。与叶片相比，愈伤组织 中的基因表达均显著下降。 3 ．研究了酚类物质生物合成与积累的光照诱导特异性，结果表明：遮荫处理对 茶树酚类物质中黄酮醇、原花青素的合成积累有较大影响，比对照分别下降了 61.5 ％和53.3 ％；但对儿茶素和木质素总量的影响相对较小，分别下降 16.7％和9.3 ％。 遮荫处理对 PAL 、CHS、CHI、F3H 、F3’H 、DFR 、LAR 、ANS 、ANR 和 UFGT 基因 的表达也表现出不同程度的抑制作用，其中对 CHI、F3H 、UFGT 和 F3’H 基因影响 较大，对 F3’5’H 影响最小。 光处理后的愈伤组织中儿茶素、原花青素、木质素的含量分别是暗处理的 2.50 、 1.74 和 3.46 倍。光照处理后 PAL 、C4H、CHS、CHI、F3H 、F3’H 、F3’5’H 、DFR 、 I LAR 、ANS 、ANR 、UFGT 基因的表达量分别是黑暗处理的 0.81、0.28、0.78、1.01、 1.05、1.22、1.54、1.19、0.64、1.39、0.81、3.45 倍。 4．从转录组中挑出基因 PAL109363 片段进行克隆，得到一条2300bp左右的片段， 与NCBI登录的 PAL （AY694188.1）基因的核苷酸序列比对有明显差异。 关键词： 茶树， 酚类物质，生物合成，特异性，基因表达 II Abstract The biosynthesis and metabolic regulation of polyphenols in tea plant are complicated network. The contents of tea polyphenols are influenced by many inner and external factors, so the accumulation of polyphenols showed specificity in development, differen