茶树离体增殖与生体系的建立.pdfVIP

摘要 本文以无性系品种茶树龙井-43腋芽为外植体，采用附加不同种类激素的MS培 养基对其进行组织培养，系统地研究了腋芽离体培养的技术体系，初步探讨了影响腋 芽培养的各种因素，初步建立了茶树离体增殖和再生体系。论文取得如下结果： (1)初代培养 腋芽初代培养采用1／2 0．49 g·L．】。春季材料的外植体污染 gmol·L。IBA+GA38．661．tmol·L。+蔗糖30g·L-l+琼脂7．0 率、褐变率比秋季的低，腋芽萌发率比秋季的高；外植体留部分叶柄、接种前用2．0g·L。1 PVP溶液浸泡30min、接种后在8C下避光培养16h可以有效降低外植体褐化率。春 季材料、合适的外植体类型、培养温度及抗氧化剂的技术组合，有助于提高茶树腋芽 初代培养的成功率。 (2)继代培养 1．tmol·L～IBA，增殖倍数可以达到2．0以上。 gmol·L以的TDZ，配合使用0．25或0．49 茶苗增殖倍数随着TDZ浓度的升高而降低，在含有TDZ的培养基中连续继代也不利 于茶苗的增殖与伸长，茶苗在不添加任何植物生长调节剂培养基中能够良好地伸育。 (3)愈伤组织的诱导与再生 从茶树组培苗上取叶片与茎段接种子的1／2MS培养基上，植物生长调节剂为TDZ IBA的全组合。当TDZ 0．1、0．5、1．01．tmol·L’1与0、O．49、O．98、1．971xrnol·Lq0．1岬aol·L以+ 0．491smol·L以时，对离体茎段和叶片愈伤组织的诱导效果最好，愈伤组织诱导率可达 配合使用的效果，说明TDZ附加适量的IBA有利于愈伤组织的形成。当TDZ浓度大 于0．5肛nol·L以时，不论是否添加IBA，离体茎段和叶片均未诱导出愈伤组织。以茶 苗为外植体时，在所有的处理上，均可以从茶苗基部诱导出愈伤组织。 茎段和叶片在TDZ IBA培养基上诱导的愈伤组织在相 0．19mol·L’1+0．499mol·L。1 同培养基上经过一次继代培养，取出愈伤组织转至新鲜的不同植物生长调节剂配比的 器官分化培养基上，培养不同时间。离体茎段与叶片诱导出的愈伤组织在所有培养基 8．88 上经过不同时间的培养均没有产生不定芽。来源于茶苗基部的愈伤组织在BA gmol·L。+IBA 出的愈伤组织的再生技术具有稳定性。 较小的再生芽不宜从愈伤组织上剪下单独培养，再生芽与愈伤组织～起培养有利 成苗率可以达到64．3％，且生长状况较好，叶片正常展开，叶绿苗壮。 (4)茶苗的生根与移栽 IBA浸泡茶苗基部5min，诱导生根效果明显。诱导2周后就 使用2450／zmol·L-1 开始有茶苗生根，第6周生根率达到70．8％，茶苗平均根数3．8条，有44．6％的根长 度大于1．5cm，茶苗基部无愈伤组织，根直接从茎上长出，有根毛。 打开瓶盖，生根茶苗在室内进行炼苗7d。经炼苗后用镊子轻轻将茶苗取出，用 自来水洗掉根部培养基，移栽至灭菌的基质中(营养土：蛭石=1：1)，移栽后30d，茶 ． 苗成活率为63．6％。 关键词：茶树，腋芽，植物生长调节剂，增殖，再生，生根 II Abstract clonal hasbeen intea A forinvitro technical propagationdeve