镁通过调节钙化相关因子的表达抑制血管钙化.pdf

目 录 中文摘要………………………………………………………………………l 英文摘要………………………………………………………………………4 英文缩写………………………………………………………………………8 研究论文镁通过调节钙化相关因子的表达抑制血管钙化 —1L—JL 刖吾………………………………………………………………………9 材料与方法……………………………………………………………11 结果……………………………………………………………………19 附图……………………………………………………………………21 附表……………………………………………………………………25 讨论……………………………………………………………………26 结论……………………………………………………………………29 参考文献………………………………………………………………30 综述 镁在慢性肾脏病血管钙化中的作用……………………………．32 致谢………………………………………………………………………41 个人简历……………………………………………………………………42 万方数据 中文摘要 镁通过调节钙化相关因子的表达抑制血管钙化 摘 要 目的：血管钙化是慢性肾脏病(CKD)患者的常见并发症，与心血 管疾病(CVD)死亡率密切相关。众所周知除传统危险因素，非传统因 素，如尿毒症毒素、矿物质代谢紊乱，尤其是高磷血症，在血管钙化的发 生发展中起着重要的作用。其中高磷可通过很多途径诱导血管平滑肌细胞 (VSMCs)发生钙化，如血管平滑肌细胞凋亡、骨源性分化、钙化促进 因子(如：核心结合因子0【．1)及抑制因子(如：基质G蛋白；骨桥蛋白质) 的平衡紊乱等。因此由于血管钙化发生的机制十分复杂，致使目前对血管 钙化尚无有效的预防和治疗方法。镁离子作为体内重要的阳离子对维持血 管弹性和心脏节律有重要的作用，因此近年来镁离子与血管钙化之间的关 系备受关注，有临床研究发现碳酸镁可能会抑制冠状动脉钙化的进展，但 镁离子和血管钙化之间的确切关系目前尚不完全明确，因此本研究旨在探 讨增加镁离子浓度后对高磷诱导血管钙化的影响及其可能的机制。 方法： 1VSMCs原代培养 取5周龄雄性健康SD大鼠胸主动脉通过组织贴壁法进行VSMCs原 代培养，应用形态学和免疫学方法进行平滑肌细胞鉴定。 2实验干预及分组 mmol／L 糖DMEM培养基；(2)高磷组：正常培基中加入10 B一甘油磷酸 (p．GP)；(3)镁干预组：在高磷培基中加入3 mmol／L (4)镁通道抑制剂(2．APB)干预组：高磷培基中加入3 MgS04 及10～mol／L 3在培养14天后测定各组VSMCs的钙化水平 red 各组VSMCs的钙化染色应用茜素红(Alizarinstain)方法；各组 VSMCs钙含量测定应用邻甲酚酞络合酮比色法。 4在培养14天后测定各组VSMCs的碱性磷酸酶(ALP)活性 万方数据 中文摘要 定ALP活性，此过程严格按照试剂盒说明书进行操作。 的表达 mRNA 照组、高磷组、镁干预组以及14天时镁通道抑制剂干预组Cbfal 的表达。 和骨桥蛋白质(OPN)mRNA的表达。