吉丽罗非鱼(尼罗×萨罗)及其两亲本的耐盐驯化差异和遗传变异的研究.pdf

DOMESTICATION THESAI．TTOLERANCE VARIATl0NAMONGTHE ANDGENETIC GILITILAPIA(，(施’D(=!忍R()肋咯 NILoTICUSqxsARoTHERoDoN THEIR TWO ?I彳E[，4Ⅳp刀砸欠(凇缯)AND PARENTS ADissertationSubmittedto the GraduateSchoolofHenanNormal University inPartial of Fulfillmentthe Requirements forthe ofMasterofScience Degree By ／1 T， (．，“o五“口行 Supervisor：Prof．LiXuejun 3 May，201 摘要 目前是世界上最重要的养殖鱼类之一，也是典型的广盐性鱼类。尼罗罗非鱼(Oreochromis melanotheron)耐盐能力强， niloticus)生长快，耐盐能力一般；萨罗罗非鱼(Sarotherodon 但生长较慢。吉丽罗非鱼(O．niloticusxS．melanotheronFe)的生长速度和耐盐性均介于 两个亲本之间，既有母本尼罗罗非鱼生长速度快，又有父本萨罗罗非鱼耐盐能力强的特 点，因此对吉丽罗非鱼分子遗传学和进化遗传学等方面的研究成为众多学者感兴趣的课 题。本文对吉丽罗非鱼及其两亲本的耐盐驯化差异和遗传变异的研究，旨在探索尼罗罗 非鱼和萨罗罗非鱼两亲本对后代生长、耐盐的贡献，以期为吉丽罗非鱼的进一步培育和 筛选打下理论基础。 1．罗非鱼SSR．PCR反应体系的建立与正交优化 用“苯酚．氯仿抽提法”对罗非鱼进行总DNA的提取，通过琼脂糖凝胶电泳和紫外 分光光度法测定提取出的总DNA的浓度，纯度和完整性都较好。利用正交试验设计L9 3个水平上进行优化，最终确立了罗非鱼SSR-PCR反应优化体系，总体积为25 pL： 10xBuffer2．5 mm01／LdNTPs2 0 pL，2．5 pL，1I_tmol／L微卫星上下游引物各1．5此，Taq 酶O．2 pL(5U／-tL)，100 性好，扩增结果稳定可靠，为下一步进行罗非鱼微卫星分子标记奠定了基础。 2．慢性盐度胁迫对吉丽罗非鱼及其两亲本耐盐性的影响 为了深入研究养殖新品种吉丽罗非鱼的耐盐性能，对吉丽罗非鱼及其两个亲本尼罗 罗非鱼和萨罗罗非鱼进行了盐度慢性胁迫实验，分析了3种罗非鱼耐盐性能的差异，建 立了盐度胁迫过程中死亡率与致死盐度及时间的回归模型，研究结果表明：(1)3种罗 非鱼的耐盐能力差异显著，吉丽罗非鱼的耐盐性能接近于萨罗罗非鱼，远高于尼罗罗非 验中尼罗罗非鱼个体间死亡时间差异最大，萨罗罗非鱼个体之间差异最小，吉丽罗非鱼 介于其间；吉丽罗非鱼和萨罗罗非鱼死亡时间都有极显著的正态负偏移，离群值和