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- 2016-02-04 发布于湖北
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食品检测中的核酸分子检测技术..ppt
食品检测中的核酸探针 前言 从基因工程技术一开始,就伴随着核酸探针的应用。在许多领域如基因研究、SNP检测、STR检测、肿瘤研究、药理学研究等方面,核酸探针都是一种强有力的工具。为了能更好的应用和发展核酸探针,有必要对核酸探针有一个系统的认识。 核酸探针是以研究和诊断为目的,用来检测特定序列核酸(DNA 或RNA)的DNA或RNA片段,称为核酸探针,作为探针的核酸探针片段可以较短(20 bp),也可以较(5kb)。 核酸探针具有特定的序列,能够与具有相应核苷酸碱基互补序列的核酸片段结合,因此可用于样品中特定基因片段的检测。 核酸探针的标记物 一.放射性标记 放射性同位素是最早使用、也是目前应用最广泛的探针标记物。常用的同位素有 32P、3 H、35S。其中,以32P应用最普遍。 放射性标记的优点是灵敏度高,可以检测到pg级;缺点是易造成放射性污染,而且同位素半衰期短、不稳定、成本高。因此,放射性标记的探针不能实现商品化。目前,许多实验室都致力于研究非放射性标记的探针。 二.非放射性标记 目前应用较多的非放射性标记物是生物素和地高辛,二者都是半抗原。 生物素是一种小分子水溶性维生素,对亲和素有独特的亲和力,两者能形成稳定复合物,通过连接在亲和素或抗生物素蛋白上的显色物质(如酶、荧光素等)进行检测。 地高辛是一种类固醇半抗原分子,可利用其抗体进行免疫检测,运用原理类似于生物素的
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