AtABA2转基因棉花的鉴定与生理表型分析.pdfVIP

摘要 干旱是我国主要的自然灾害之一，常常给农业生产带来很大的损失，严重影 响了我国的重要经济作物棉花的产量。棉花是一种优良的天然纤维纺织原料，然 而其种质资源缺乏，常规棉花抗旱育种是较困难的。目前，随着生物技术的发展， 基因工程育种已成为一种有利的育种手段，即将外源基因通过生物技术转入作物 体内，使其整合到基因组中并得到稳定的遗传和表达到达定向地改造生物形状的 目的。因此，培育耐旱、抗旱的棉花是从根本上解决干旱影响棉花产量的措施显 得非常重要。 脱落酸(ABA)这种激素在植物中是非常重要的，它在种子发育中调节休 眠方面起着关键的作用，同时调节气孑L的关闭，参与在植物逆境下的反应。己知 键的作用。本论文通过转基因技术提高棉花合成ABA(尤其在胁迫条件下)能 力，以期提高棉花的耐旱性。 本论文以冀合713、coker201的胚性愈伤组织为受体，利用农杆菌介导法成 功导入了AtABA2基因。利用花粉管通道法将AtABA2基因导入了新陆早35、36 母、中棉所16三个品种，后者得到了大量的转基因植株。利用田问喷洒抗生素 和PCR鉴定的方法进行筛选，将得到的阳性植株扩大培养。利用分子杂交技术 确认AtABA2基因已经整合到T4带转基因棉花植株，且都是单拷贝。此外，我们 分析了转基因棉花和未转基因空白对照植株在干旱胁迫处理后的AtABA2基因的 表达情况，RT-PCR结果显示转基因棉花体内AtABA2基因均有表达。并对转 AtABA2基因的棉花植株和空白对照幼苗干旱处理后，观测其生长状况，并测定 了其离体叶片失水率相关指标。比较了干旱胁迫后其气孔的形态和密度以及侧根 的生长状况。发现无论是长势还是失水率方面，转基因植株表现均较好，而其气 孔的形态和密度以及侧根在数量上和均长上几乎没有区别。综合分析表明转 AtABA2基因提高了棉花的耐早能力。 关键词：花粉管通道法，农杆菌介导法，转基因，AtABA?基因 ABSTRACT natural isanexcellenttextilematerialduetoitslow Cottoncan excellentfiber,which provide and thermal tolackofcotton resource，less cost，largeoutputgood properties．Owing germplasm ismadeinCottontraditional hasbeenmadeinbiotechnology, process breeding．Greatprogress suchastheintroductionofall intothe toinheriteand exogenousgene cropgenome express isa economic isa modify veryimportant crops，Chinabig steadily,thusorganisms．CoRon isthemostinfluentialfactortothe cotton—producingcountries．Drought globalagricultural andcausethemostseriouseconomiclosses．About51 ofChina’Stotalarable production percent landisaridandsemi．aridarable 2．5millionhm2offarmlandsarcaffectedthe land，nearly