Dystrophinopathy分子生物学和临床研究.pdf

小结…………………………………………………………………………………………69 参考文献……………………………………………………………………69 结论………………………………………………………………………………一72 综述二遗传性骨骼肌疾病下肢骨骼肌MRI研究进展……………………94 致谢…………………………………………………………………………………………………·107 个人简历…………………………………………………………………………109 中文摘要 Dystrophinopathy分子生物学及Il盎床研究 摘 要 女均可发病，但男性患者占绝大多数，临床表型包括：杜兴型肌营养不良 (Duchennemuscular muscular dilated 股四头肌肌病)、X连锁扩张型心肌病(X．1inked Ⅺ。DCM)、有／无症状DMD基因变异携带者。其中DMD是发病率最高、 临床表现最重类型，多于5-6岁起病，表现走路慢，易摔倒，走路姿势异 常，进展加重出现明显双下肢、腰带肌无力，蹲下站起、上下楼梯费力， 约10．12岁左右不能行走，20．30岁死于心肺功能衰竭。BMDI临床症状出 现较DMD晚，可保持行走能力到16岁，病情进展相对缓慢，寿命较长。 女性DMD基因缺陷携带者和邻近基因缺失女性患者临床表现差异巨大， 重者可为典型DMD表现，轻者表现为轻度近端肌无力、腓肠肌假性肥大， 甚至肌肉功能基本正常。 基端与肌动蛋白(actin)或其相关蛋白相连，棒状端拥有长的24个膜收缩 glycoprotein 复合体破坏使肌细胞膜脆性增加、稳定性破坏，强烈的肌肉收缩加剧肌细 胞膜破坏使钙离子内流加速肌纤维的破坏。 患者进行分子病理和基因测序，重点选择2例有症状女性DMD基因变异 患者进行下肢骨骼肌MRI研究分析；3)DMD患者激素治疗分析，旨在 中文摘要 床、病理及分子生物学特点及治疗观察经验。 第一部分Dystrophinopathy分子生物学研究 遗传性骨骼肌疾病，致病基因DMD定位在Xp21．2，包含79个外显子， muscular 编码蛋白dystrophin。临床表型包括：Duchenne Beckermuscular dilated 的女性DMD基因变异携带者出现程度不同的肌无力表现，称为有症状携 带者(manifesting 倾斜的X染色体失活模式是目前研究热点。因病例较少尚未发现女性 MCs基因热点突变，基因变异．X染色体失活．临床表现关系不明。本文对 的临床、基因变异特点及其可能的发病机制。 方法： 1临床病例入选标准：1)临床表现：缓慢进行性加重四肢近端肌、腰带 图呈肌源性损害；3)活检骨骼肌组织化学染色呈肌营养不良改变，抗 ／部分缺失。 2活检骨骼肌病理分析：入选病例行骨骼肌活检组织化学染色和抗 dystrophin-N、一C、R单克隆抗体免疫组织化学染色病理分析。 3 测序检测点突变。 4女性MCs2例及家系临床和基因分析： 4．1家系资料：选取有肢体近端肌无力、萎缩的2例女性患者，并且家族 中有男性DMD／BMD患者的家系。 4．2对家系患者及部分亲属行心电图、心肌核素显像及下肢肌肉MRI检 查，评价心肌、骨骼肌受累情况。 4．3骨骼肌活检组化和免疫组化染色：家系1先证者及家系2先证者及Ⅳ 中文摘要 ．4行开放式左肱二头肌活检病理分析(方法同上)。 4．4核型分析：女性MCs和女性无症状携带者做常规GRQ带显色核型分 析。 4．5DMD基因测序：方法同上。 4．6 chromosome X染色体失活(X 周血DNA的扩增雄激素受体(androgen 酶消化作用确定其父母双方的X染色体的活性。 结果： 者10例，女性MCs2例，无症状高CK血症1例。 2骨骼肌活检组化和免疫组化病理：全部病例活检骨骼肌组织化学染色呈 (13例)。 者发现DMD外显子缺失突变。 4女