含外源T细胞表位猪细小病毒VP2基因真核表达质粒构建及免疫原性的研究.pdf

摘要 猪细小病毒(Porcine circovims 纯感染猪以外，该病毒与猪圆环病毒(Porcine 为普遍。这两种传染病在猪场并发或继发感染现象较为普遍，给养猪业造成了巨大的 经济损失。猪细小病毒是一种自主复制性DNA病毒，VP2衣壳蛋白是PPV的主要保 多肽P21，为一免疫优势T细胞表位，免疫动物后，动物体内的淋巴细胞明显增多， 而且免疫动物血清中PCV-2特异的抗体水平亦明显升高，是研制抗原表位疫苗的优 势目标表位。本研究选择猪细小病毒VP2基因以及猪圆环病毒2型多肽P21为目的 质粒进行了小鼠免疫试验，分析了重组质粒诱导小鼠产生的体液免疫和细胞免疫反 应。 I和XhoI之间的多克 后的VP2基因克隆至真核表达载体pcDNA3．1(+)的BamH 隆位点上，并在VP2基因的5’端插入用酶促合成方法获得猪圆环病毒2型的T细胞 P21基因均正确插入到载体中。 表达的重组蛋白大小约为67kDa，与预测蛋白大小相符，并且表达的蛋白可被鼠源 应，并且对淋巴细胞的增殖反应有明显促进作用。为研制抗PCV-2和PPV核酸疫苗 提供了实验依据。 关键词：猪细小病毒；VP2基因；猪圆环病毒：P21基因；共表达质粒 Constructionand ofRecombinantof immunogenicity plasmidporcineparvovirus VP2 an T cell genecarryingexogenousepitope GraduateStudent：Sun yan-xin Supervisor：．Prof．FanJing-hui Medicine Veterinary Major：．Preventive Abstract Porcine themaincauseof failurein parvovirus(Porcineparvovirus，PPV)is reproductivegnts． In PPVadditiontotheinfected virusand circoviras alone，the circovirus(PorcineType2， pigs porcine infections8remuchmorecommon．Thetwokindsofinfecfiomdiseasesinthe PCV-2)，mixed pig concurrentor infectionismore economiclossestothe secondary prevalent， huge pigindustry gnisuac．． VP2 ofPPVis is conserved．PCV-2islocated protein majorprotectiveantigen，andhighly