稻瘟病菌T-DNA插入方法优化及其突变体分析.pdfVIP

稻瘟病菌T-DNA插入方法优化及其突变体分析.pdf

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卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ()* + ! ,) +# 年 月 $%% ’ !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 -.*/ $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 稻瘟病菌!#$% 插入方法优化及其突变体分析 ,, , ! $ $ ! $ $ ! $ 李宏宇 潘初沂 陈 涵 赵长江 鲁国东 王宗华 ! $ (福建农林大学生命科学学院;福建农林大学植物保护学院,福州 5%%%$ ) (中国人民解放军军需大学,长春 !%%4$ ) 摘 要 优化了农杆菌介导转化稻瘟病菌获得 插入突变的条件,包括选择转化子的潮霉素 用量,抑制农 20D,E F 杆菌的抗生素头孢噻肟钠和羧苄青霉素的配比,不同转化阶段培养基的选择等。转化! G !%4 个孢子平均可获得约 个左右的转化子, 和 检测表明约 转化子中含 插入。对 个突变体进行形态变异 5%% HIJ 2EKL0HIJ 15 M 20D,E !5$% 观察,发现菌落颜色突变的有 个;随机取 个突变体进行比较,发现产孢量减少的 个,孢子萌发率降低的 !5 51 # 1 个,附着胞形成率降低的 个;还获得对水稻品种 ( )和 ( )致病的突变体,为进一步克隆相 I!%!LEI H90! ’50!0!$’ H90 应的无毒基因奠定了基础。 关键词 稻瘟病菌, ,插入突变,功能基因组学 20D,E 中图分类号 文献标识码 文章编号 ( ) N’5! E !%%%0%4! $%% %#0%#!0%5 稻瘟病是由稻瘟病菌( ( 的转化子基因组中插入比例高,而且多为单拷贝插 3+1$+4(*/% 1*#%+ O30 ) )引起,既是水稻最重要病害之一,也是研 入,因而更有利于分离被标签的基因。目前,应用 P3QR F8QQ + [] [,] 究病原真菌和植物相互作用的模式病害系统! 。水

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