肌糖原的酵解作用.pptVIP

实验八 肌糖原的酵解作用 目的与要求 了解糖酵解作用在糖代谢中的地位和生理意义 掌握鉴定糖酵解作用的原理和方法。 动物淀粉，是动物的糖贮存库(体内能源库)。糖原的结构与支链淀粉有基本相同的结构，只是糖原的分支更多。 在动物的肝脏和肌肉中含量最大，当动物血液中葡萄糖含量较高时，就会结合成糖原储存于肝脏中，当葡萄糖含量降低时，糖原就可分解成葡萄糖而供给机体能量。 糖酵解(EMP)途径 肌糖原的酵解作用：即肌糖原在缺氧的条件下，经过一系列的酶促反应，最后转变成乳酸的过程。 肌糖原的酵解作用是糖类供给组织能量的一种方式。 1. 糖原→ ( 糖原磷酸化酶 ) → 1- 磷酸 - 葡萄糖→ 6- 磷酸葡萄糖，进入糖酵解。  1/n(C6H10O5)n+H2O 2CH3CHOHCOOH 催化酵解作用的酶系统全部存在于肌肉提取液中，而催化呼吸作用（即三羧酸循环）的酶系统，则集中在线粒体中，因此可用淀粉代替糖原。 影响显色的因素 1. 糖的影响 加Ca(OH)2 和CuSO4去除。 2. 蛋白质 加三氯乙酸(TCA)沉淀。 3. 无机离子 Mg2+是许多酶的辅助因子, 必定影响酶促反应速度。 Cu2+可增强乳酸的颜色反应。 试剂和器材 试剂： 0.5%淀粉溶液；20%TCA溶液， 1/15M磷酸缓冲液（pH7.4）， 氢氧化钙（粉末),饱和硫酸铜； 浓硫酸；对羟基联苯试剂 。 器材 37℃ 恒温水浴， 沸水浴，冰水浴。 1. 加入少许液体石蜡隔绝空气，以1毫升／管为宜； 2. 37℃保温1小时； 3.为使糖沉淀完全，放置30分钟并不时振荡（封口膜）； 4.在乳酸测定中，试管必须洁净、干燥，防止污染；4支试管洗净放入烘箱烘干 5.所用滴管大小尽可能一致，减少误差。若显色较慢，则可将试管放入37℃恒温水浴中保温10min，再比较各管颜色。 6.第二次过滤，EP管离心 思考题 人体和动植物体中糖的贮存形式是什么？实验时，为什么可以用淀粉代替糖原？ 试述糖酵解作用的生理意义？ * * 糖 原 是指细胞在胞浆中分解葡萄糖生成丙酮酸的过程，并伴有少量ATP的生成。 在缺氧条件下丙酮酸被还原为乳酸(lactate)称为糖酵解。 有氧条件下丙酮酸可进一步氧化分解生成乙酰CoA进入三羧酸循环，生成CO2和H2O。 无O2 2. 乳酸的鉴定（灵敏度1～5微克/毫升） 紫红色 材料 兔肉糜。 注意事项