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淡水贝类多糖提取工艺的优选 作者：刘小燕，李朝品， 湛孝东 【关键词】 贝类多糖；,,提取；,,正交实验 　　摘要：目的优选淡水贝类多糖的最佳提取工艺。方法采用水提法，以多糖含量为指标，利用正交实验法对提取过程中的醇沉浓度、浸提温度、浸提比及浸提时间4个因素进行优选研究。结果最佳提取条件为：加无水乙醇至醇沉浓度为75%，浸提温度60℃，浸提比1∶2，浸提时间6 h。结论 优化的淡水贝类水提醇沉工艺简便，合理，可行。 　　关键词：贝类多糖； 提取； 正交实验 　　Abstract：ObjectiveTo optimize the extraction process of shellfish polysaccharide. MethodsTaking the content of polysaccharide as an index, four technological factors of water extraction process, ie, alcohol strength, extraction temperature, water volume used and extraction time were optimized by orthogonal test. ResultsThe ideal extraction process was as follows: dehydrated alcohol was added to the fluid until the alcohol content up to 75%; extraction with 60 ℃; extraction with water for two times; each extraction running 6 hours. ConclusionThe optimum extracting procedure simple, reasonable and reliable. 　　Key words：Shellfish polysaccharide; Extraction; Orthogonal test 　　贝类属软体动物门，目前全世界的现生种类约有108 000种，根据它们栖息环境不同分为海洋贝类、淡水贝类和陆生贝类［1］。本文对淡水贝类如河蚌，田螺等的多糖提取工艺进行了较为系统的研究，初步探讨出了一条较为理想的提取工艺。本文主要以中国圆田螺为例报道研究结果。中国圆田螺Cipangopaludina chinensis属软体动物门（Phylum Mollusca），腹足纲（Gastropoda），前鳃亚纲（Prosobranchia），中腹足目（Mesogastropoda），田螺科（Viviparidae），圆田螺属(Cipangopaludina Hannibal)。《本草纲目》记载“田螺利湿清热，止渴醒酒，利大小便；治脚气、黄疸”。民间根据田螺有“清湿热、利小便”等之作用，常应用于治疗小便不畅、黄疸、中耳炎、痔疮等症。近年，有关贝类多糖的研究证实其具有抗肿瘤、抗病毒、抗凝血、降血脂、降血糖等多种生物学活性［2］，引起了学术界关注。贝类多糖的提取方法通常有水提法、碱提法和酶提法［3］，但是各种方法提取的最佳条件尚有待探讨。本实验采用水提法提取，进行了醇沉浓度、浸提温度、浸提比及浸提时间四因素三水平的正交实验，以找出一种最佳的提取方案，为进一步研究贝类多糖活性奠定基础。 　　1 器材 　　1.1 原料中国圆田螺，当地采集。 　　1.2 仪器和试剂无水乙醇（蚌埠化学试剂厂，AR），丙酮（江苏省宜兴市展望化工试剂厂，AR），高速组织捣碎机（上海标本模型厂），高速离心机，恒温磁力搅拌器(国华电器有限公司)， DZF6030A真空干燥箱（上海一恒科技有限公司），721分光光度计。 　　2 方法与结果 　　2.1 影响淡水贝类多糖提取主要因素的选择根据文献报道，影响水浸提多糖的因素主要有醇沉浓度、浸提温度、浸提比、浸提时间等，本实验对醇沉浓度、浸提温度、浸提比、浸提时间等因素采用正交实验法进行优选。因素水平设计见表1。选用L9(34)正交表，实验安排见表2。 　　2.2 正交实验设计取中国圆田螺9份，清洗去壳每份取螺肉200 g，匀浆过滤后按正交方案（表2）进行水提、醇沉，沉淀分别用适量无水乙醇、乙醚、丙酮依次洗涤去脂后干燥。 　　表1 淡水贝类多糖提取的因素水平（略） 　　2.3 淡水贝类粗多糖含量测定以葡萄糖为标准品，采用苯酚－硫酸法测定淡水贝类粗多糖的多糖含量［4］。 　　2.3.1 总糖含量标准曲线