东北三省猪场ssuis感染状况调查及s.suis7比较蛋白组学研究.pdf

皇曼曼曼曼舅曼曼寰鼍舅曼曼量曼曼曼曼皇曼曼曼曼曼曼曼笪曼喜舅■‘‘习a Kn圉 目 录 东．1E伙、fl，』、。’≯农’≯卜’≯f■i金乏 3．2MLST分析结果…………………………………………………………………………27 3．3GDH蛋白的原核表达…………………………………………………………………………28 3．3．1GDH基冈的PCR扩增与克隆………………………………………………………28 3．3．2GDH蛋白的原核表达和SDS—PAGE鉴定…………………………………………．．29 3．3．3表达蛋白的Westen．blot鉴定……………………………………………………………………30 3．4间接ELISA方法的建立结果……………………………………………………………30 3．4．1间接ELISA相关条件确定试验结果………………………………………………．3l 3．4．3交叉反廊试验………………………………………………………………………31 3．4．4批内重复性试验…………………………………………………………………………3l 3．4．5批间重复性试验………………………………………………………………………………3l 3．4．6敏感性试验……………………………．^．．…………………………………………32 3．4．7猪链球菌抗体检测结果……………………………………………………………．32 3．5比较蛋白组学的研究……………………………………………………………………32 3．5．1两株猪链球凶7型分离株的致病力实验…………………………………………．．33 3．5．2双向电泳结果……………………………………………………………………………………一33 3．5．3质谱鉴定结果……………………………………………………………………………………．．34 3．5．4实时荧光定量RT—PCR测定及数据分析…………………………………………．36 3．5．510蛋白基冈的mRNA表达鹫的比较结果…………………………………………．．37 4讨论………………………………………………………………………………………………………………………．40 4．1猪链球菌在东北三省猪场的感染状况…………………………………………………40 4．2猪链球菌7型分离株的致病性试验……………………………………………………4I 4．3猪链球菌抗体检测方法的建立……………………………………………………………42 4．4本研究发现的差异蛋白的功能分析……………………………………………………44 5结论………………………………………………………………………………………………………………………．49 致{射………………………………………………………………………………………………………………………．50 参考文献……………………………………………………………………………………………………5l 缩略词表………………………………………………………………………………………．57 在读期间发表论文情况………………………………………………………………………．．58 rS C()NTrN CONTENTS AbstractinChinese．．．．．．．．．……．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．I AbstractinEnglish．．……………．…．．．．．．……．．……．……．……．…．………．…．…．……．……．．…．………．．．…．…lV l Introduction………………………………………………………………………………………………………………l 1．1 Research ofS．suis．．．．．…．……………．………．…………．……．……．．．…．………．…．…．．………．．1 progress 1．1．1S．suisresearch