多浆旱生植物霸液泡膜nalt;#39;+gt;hlt;#39;+gt;逆向转运蛋白基因的克隆及表达分析.pdf

兰州人学坝卜学位论义 多浆早刍i植物霸I．液泡】膜Na+川+逆向转运生[J壮|大I的克降及表达分丰斤 摘要 盐胁迫是影响作物生长和产量的主要非生物因素之一。土壤中过高的Na+浓度引 起离子毒害、渗透胁迫和K+／Na+比率失调使植物新陈代谢紊乱，从而对植物造成伤 害。植物抵御盐胁迫的有效策略之一是通过液泡膜Na+／H+逆向转运蛋白将细胞质中 过多的Na+区域化在液泡内，以减轻过量Na+对细胞质的伤害，同时维持细胞的渗透 势，从而提高植物的耐盐抗旱性。从极端干旱环境中生存的荒漠植物中克隆和鉴定液 泡膜Na+／H+逆向转运蛋白基因，对农作物和优良牧草耐盐抗旱性的遗传改良具有重 要意义。 本研究以多浆早生植物霸王(Zygophyllum 盐处理下的表达进行了研究。主要结果如下： 1．根据已知的液泡膜Na+／H+逆向转运蛋白基因的保守区设计简并性引物，采用 599 eDNA，将其命名为ZxNHX。该cDNA全长2127 bp，包括1 bp的开放阅读框(ORF)、 213 bp的5’非翻译区(5’UTR)、315bp的3’非翻译区(3’UTR)和25bp的poly(A) KDa，等电点为 尾巴。此eDNA编码一个532个氨基酸的多肽，推测分子量为58．8 注册，登录号为EUl03624。 克隆到Aetin基因片段，将其命名为ZxACT。该片段大小为598bp，编码198个氨基 酸。序列分析表明，ZxACT与其他植物的Actin基因核苷酸序列的同源性在82％以上； 9550。 EU01 mmol·L‘1 明显高于根：在高浓度盐处理下(150、200 NaCI)，ZxNHX转录水平明显上 调，在处理3、12h后达到最大值。由此表明，ZxNHX表达受盐胁迫的诱导和调节。 关键词：多浆旱生植物；霸王(Zygophyllum 蛋白； 及慨耐盐抗旱性；表达分析 兰州人学坝fj学位论义 多浆旱生植物霸I：液泡噤Na‘／H。逆向转运生【，』埔I六I的觅降发表达分析 Abstract ofthe abiotic factors isone stress that effectthe Salinity major adversely cropplant and sodiumionsinsoilcause excessive ions growthyield．The toxicity,osmoticstresses， andthe inK1／N吞homeostasis．Oneoftheeffective thatenable to damage strategies plants resistsaltstressisto Na+intothevacuolethevacuolarNa+／H+ compartmentalize by canavertthedeleteriouseffectsofNa+inthe andmaintain antiporter．This process cytosol osmotic tO balance Na+accumulatedinthevacuole