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小鼠祼卵体外成系统建立及束缚应激对小鼠卵母细胞染色体倍性影响的研究
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目录 Y2303945
中文摘要……………………………………………………………………………………1
ABSTRACT………………………·…………………………………………………·……………………·…·…………·4
PART
I通过提高GSH水平完善小鼠裸卵体外成熟系统……………………………一7
1、前言…………………………………………………………………………………………………………………．7
1．1卵母细胞成熟…………………………………………………………………………·7
1．1．1卵母细胞核成熟和胞质成熟………………………………………………………”8
1．1．2卵母细胞休外成熟…………………………………………………………………一8
1．1．3影响卵母细胞体外成熟的因素……………………………………………………一9
1．1．4卵母细胞体外成熟质量的判定标准…一…………………………………………．10
1．2裸卵的体外成熟………………………………………………………………………1l
1．2．1_研究裸卵体外成熟的重要意义……………………………………………………·11
1．2．2卵丘细胞在卵母细胞成熟过程中的作用…………………………………………12
1．2．3裸卵体外成熟系统的研究进展……………………………………………………13
1．3细胞中谷胱甘肽的合成及其重要作用……………………………………………·14
1．3．1哺乳动物细胞中的谷胱甘肽………………………………………………………14
●
1．3．2卵母细胞中的谷胱甘肽……………………………………………………………17
1．4巯基物质促进GSH合成的机制………………………………………………………20
1．4．1胱氨酸在GSH合成中的作用……………………………………………………一20
1．4．2半胱胺在GSH合成中的作用……………………………………………………”22
1．4．3半胱胺和胱氨酸之问的相互作用…………………………………………………23
1．5本研究的主要内容……………………………………………………………………24
2材料与方法……………………………………………………………………………一25
2．1主要试剂及配制………………………………………………………………………25
2．2实验动物饲养及小鼠超排处理………………………………………………………26
2．3小鼠卵母细胞获取……………………………………………………………………26
2．4山羊卵母细胞获取……………………………………………………………………26
2．5小鼠及山羊卵丘细胞单层的制备……………………………………………………27
2．6小鼠卵母细胞体外成熟培养………………………………………………………．27
2．7小鼠卵母细胞体外受精及原核观察…………………………………………………27
2．8透明带硬化检测………………………………………………………………………28
2．9小鼠卵母细胞化学激活………………………………………………………………28
2．10胚胎培养……………………………………………………………………………．28
2．11 GSH水平检测………………………………………………………………………．28
2．12胚胎移植……………………………………………………………………………．29
2．13巯基物质的毛细管电泳检测………………………………………………………·30
2．15卵丘细胞中胱氨酸还原酶活性检测………………………………………………·32
2．16数据分析……………………………………………………………………………·32
3结果………………………………………………………………………………………33
3．1向成熟培养液中添加半胱胺和胱氨酸对小鼠卵母细胞GSH合成的影响………··33
3．1．1向成熟培养液中添加不同浓度的胱氨酸对小鼠卵母细胞胞质中GSH合成的
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