异源强毒株hn因替换对嵌合体新城疫rlasota病毒致病力影响的研究.pdfVIP

摘 要 1edi 新城疫(Newcastsease，ND)是危害世界养禽业的重大烈性传染 edisease 病。由新城疫病毒(Newcastl dae)、禽副黏病毒属 负链RNA病毒，属于副黏病毒科(Paramyxoviri (Avulaviru 5kb，其基因组编码的蛋白包括核蛋白 S)。NDV基因组全长l (nucl i X eoprote ion i propeln，M)，融合蛋白(fusprotens，F)，血凝素一神经氨酸酶蛋白 inin—neuramini (hemagglut RNA or1arge polymerase polymerase，L)六个独立转录编码单元。 人们对新城疫病毒致病性的研究主要集中在F蛋白和HN蛋白的致病力 上，认为F蛋白的裂解位点的氨基酸序列是新城疫病毒致病性的主要决定 中扮演着重要角色，但是HN基因对致病性的确切作用还不十分明确。HN 蛋白具有血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)两种活性。识别细胞表面的唾液酸 的受体并促进F蛋白的融合作用。因此，HN蛋白在病毒的感染过程中扮演 着重要的角色。 本研究在成功重组新城疫Lasota的基础上，利用反向遗传操作技术， II pBluscriptKS(+／-)载体多克隆位点上，测序正确后，利用特定的Mun I酶切位点酶切得HN基因片段。构建全长质粒，进行转染，收获 I和Spe 收获病毒阳性尿囊液提取病毒基因组RNA，进行RT—PCR及序列分析。 白的来源对于NDV的生物学活性有一定的影响，以及亲本毒株及嵌合病毒 红细胞吸附性和融合作用。结果表明：嵌合病毒红细胞吸附性明显增强， 分别为l48h、1 强毒力水平，仍属于弱毒株。结果也表明NDV的致病性是多基因作用的结 果，F蛋白的裂解位点并不是NDV毒力的唯一决定因素。 关键词：新城疫病毒；血凝素一神经氨酸酶：LaSota疫苗株；反向遗传： F48E9；HB38 chimeras EvaluationofNewcastlediseasevirus expressing the of velogenic Hemagglutinin-Neuraminidaseprotein strainsinthecontextofalentogenic virusbackbone AbStraCt Newcastle oneofthemostseriousinfectiousdiseasesof disease(ND)is of virulentNDoutbreaks．NDcausative ND，is poultry，and V，the agent RNAvirusthat to sense belongs anon．segmented，s