氟烷基因在中国方猪种中的分布及其pcr产物序列多态性研究.pdfVIP

中文摘要 氟烷基因是导致猪应激综合征、影响猪肉品质的一个主效基因。rln型个体表现 对应激敏感，胴体出现较高频率的PSE肉，给养猪生产造成严重的经济损失。 本实验采用PCR—RFLP技术检测了中国地方猪种成华猪、雅南猪、内江猪和太湖 猪的氟烷基因型，并对氟烷基因PCR产物序列多态性进行了分析。 太湖猪62头，雅南猪30头。)氟烷基因型均为NN。 在本次研究中，总共测定了五个品种(四个地方猪种和一个外种猪)16个个体 进行分析，分析结果表明：在这21条序列中，共发现16个变异位点，根据这些变 异位点界定出15种单倍型。在这些变异位点中，其中有三个为颠换，其余的为转换。 在这些变异位点中，内江猪四个个体18662位碱基均为T，而其它品种则无此突变， T18“2为内江猪品种特征。在其他品种内并未发现其他有品种特征的碱基突变。 所测16条序列碱基组成相似。对这些序列进行分析，品种内的单倍型多样度和 核苷酸多样度以及品种问的群体问平均核苷酸差异数(K)、群体问平均每位点核苷 酸替代数(Dxy)、每位点净核苷酸替代数(Da)都较低。用双参数模型来计算各个 品种内和品种间的遗传距离，也得到了类似的结论。 氟烷基因PCR产物序列中445～579为外显子部分，仅仅发现同义突变。将所 测的序列翻译为氨基酸后，没有发现有氨基酸变异。 关键词：猪、氟烷基因、PCR-RFLP、DNA序列多态性 1前言 stress 猪应激综合症(porcine hyperthermia 恶性高热(体温骤升至42C～45C)、(mailgant 吸急促、心跳过速、肌肉强直、后肢呈现痉挛性收缩、突然死亡、肉质变劣等征候 PSE肉的产生已给世界各国的养猪生产、销售加工造成了巨大损失。 基因或兰尼定受体基因(rynodine 肉品质的一个主效基因，国内外学者对其作了深入细致的研究。 1．1氟烷基因的作用机理 A 了应激综合症发源地可能在肌肉组织细胞内。 Knudson(1990)发现，骨骼肌的兰尼定受体(Rynodine 白酶消化后，正常猪与应激猪的带型不同，表明正常猪与应激猪之间的氨基酸发生 变，其中只有一处碱基改变导致了氨基酸改变，即兰尼定受体eDNA中的CⅢ3突变 和功能的改变。这种改变导致应激状态下ca2+大量非正常释放，引起电解质代谢紊 乱，出现肌肉持续收缩，使猪产生恶性高热。大量析出的ca2+激活过量的糖元酵解， 使肌糖元酵解过程加速，引起肌肉pH值的异常变化，导致劣质猪肉(PSE肉)发生。 1．2氟烷基因连锁群 根据已有资料分析，氟烷基因连锁群主要包括：磷酸已糖异构酶(PHl8)、H一 (6一PGD“)基因(Archibald，A L．Imlah，E1985；Archibald，A L．1991；Aehibald． et AL，1989；Zeveren，Avon a1．1988a；1988b；1988c；1988d；Muller，Selal．1989)。综 合了已报道的资料，氟烷基因连锁群定位及其座位顺序见图1。 5 A／O血型(S5)……·-Hal“～…-PHIB一…～(H8)……一P o．2～一．．6．PGDA 固l氟烷基因连锁群的遗传图 1．3氟烷基因定位 以氟烷基因c￡lNA部分片段为探针，运用原位杂交技术，已将人及部分动物的氟 etal， 1991；1990)。 图2猪氟烷基因座位及其连锁群的染色体定位 表1氟烷基因定位表 物种