猪繁殖与呼吸综征病毒gp4白单克隆抗体制备与抗原表位筛选.pdfVIP

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2016-02-20 发布于贵州
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猪繁殖与呼吸综征病毒gp4白单克隆抗体制备与抗原表位筛选.pdf

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猪繁殖与呼吸综征病毒gp4白单克隆抗体制备与抗原表位筛选

I I I II I IIUl IIIIIIIIIIIl II1 Y277229 曼曼目录摘要…………………………………………………………………………………………………………………………．．I 英文摘要………………………………………………………………………………………．．Ⅲ 1前言……………………………………………………………………………………………。．1 1．1猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)概述……………………………………………………1 1．1．1PRRS的流行病学………………………………………………………………………l 1．1．2 PRRS的病原学…………………………………………………………………………1 1．1．3 PRRS的基因组………………………………………………………………………．．2 1．1．4PRRSV GP4蛋白……………………………………………………………………………………………．2 1．1．5 GP4在PRRS新型疫苗研制中的作用………………………………………………．．3 1．2抗原表位的研究和应用…………………………………………………………………．3 1．2．1抗原表位的概述………………………………………………………………………3 1．2．2 T细胞抗原表位的研究手段…………………………………………………………．4 1．2．3 B细胞抗原表位的研究手段…………………………………………………………．4 1．2,4表位疫苗的研究进展…………………………………………………………………5 1．2．5PRRSV GP4表位的研究进展…………………………………………………………6 1．3研究目的和意义………………………………………………………………………………．6 2材料与方法……………………………………………………………………………………7 2．1材料……………………………………………………………………………………………………………………7 2．1．1菌株、载体与质粒……………………………………………………………………7 2．1．2细胞与病毒…………………………………………………………………………一7 2．1．3实验动物………………………………………………………………………………7 2．1．4主要试剂………………………………………………………………………………7 2．1．5标准参照物…………………………………………………………………………．．8 2．1．6主要仪器设备…………………………………………………………………………8 2．2实验方法…………………………………………………………………………………9 2．2．1PRRSV GP4基因亚克隆及原核表达…………………………………………………9 2．2．2PRRSV GP4蛋白单克隆抗体制备…………………………………………………．．12 2．2．3PRRSV GP4蛋白单克隆抗体的特性鉴定…………………………………………．．14 2．2．4应用噬菌体展示技术筛选PRRSVGP4蛋白抗原表位……………………………．16 3结果………………………………………………………………………………………………………………………．．19 PRRSV 3．1 GP4基因重组表达质粒的构建和鉴定…………………………………………19 3．2P