猪伪狂犬病毒g抗体检测红细胞凝集试验方法和金标免疫层析法的建立及应用.pdfVIP

猪伪狂犬病毒gE抗体检测红细胞凝集试验方 法和金标免疫层析法的建立及应用 摘要 Virus，PRV) 引起的家畜和野生动物以发热、奇痒(猪除外)及脑脊髓炎为主要症状一 种高度接触性传染病。目前，针对国内广泛使用PRVgE基因缺失苗进行接 种免疫，通过检测班抗体即可区分出疫苗株和野毒株。 性反应。红细胞凝集试验证实，2E8kgE融合蛋白既能够与人红细胞结合， 又能够与PRV抗体反应，具有双功能特性。 白双功能融合蛋白为抗原，建立了检测PRV gE抗体的红细胞凝集试验方 法：利用方阵滴定试验筛选出最佳抗原工作浓度为55“g／mL，血清最佳稀 血清和PRV gE缺失疫苗接种的猪免疫血清均不发生反应，与PRV阳性血 断试剂盒检测结果比较，50份猪血清的阴、阳性检出符合率均为100％。红 细胞凝集试验检测方法具有敏感性和特异性较高的特点。 与此同时，该研究以金标免疫层析法为基础，以融合蛋白为诊断抗原 和胶体金标记物，以羊抗猪IgG包被硝酸纤维膜作为质控带，制备了PRVgE 抗体检测胶体金试纸条。利用方阵滴定试验筛选出金标抗原最佳工作浓度 gE 缺失疫苗接种的猪免疫血清检测线均不出现红色条带，与PRV阳性血清反 应检测线出现红色条带。试纸条操作简单，肉眼于15min内可判定结果； 试纸条在室温保存6个月，其特异性和敏感性没有明显变化；与美国IDEXX 和法国LSI 符合率均为90．60％。胶体金试纸条具有操作简便、敏感性和特异性较高的 特点，可用于PRV野毒感染的快速筛查。 关键词：伪狂犬病毒；抗人红细胞单链抗体；红细胞凝集试验；金标免疫 层析法； Ⅱ TheDeveI and I i na I i cati onof ut opmentApp ErythrocyteAgg ati on CoI 1 0i daI GoI dI Dete and i C Assay cti on forDetecti 013oftheAnti to ofPseud Assay bodygE - ■ ●■● ● ^ ■ Orabl eSVI rusI n P0rc I ne ABSTRACT PseudorabiesdiseasewhichiscausedPseudorabiesVirusCallmake by domesticandwildanimal asa fever,itch(exceptpig)andencephalomyelitis disease．At candiscriminatevaccineimmunedand contagious present，We pigs wildinfected defectionofthe basedthe