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茶树根际促生细的研究

摘要 植物根际微生物是植物根际微环境中的重要生物类群,对植物生长发育 具有明显的影响,本研究利用选择性培养基,对不同茶园根际微生物进行 了分离,研究了茶树根际细菌、真菌、放线菌的数量变化:运用选择性培 养基对根际固氮、解磷和解钾细菌进行了筛选,运用生物学方法对具产植 物激索潜能的促生细菌和植物病原真菌拮抗细菌进行了筛选,对细菌分离 物进行了鉴定;对一株植物病原真菌拮抗细菌的抗菌物质进行了分离、纯 化并研究了其部分理化性质。主要结果如下。 1土壤肥沃的茶园根际细菌的数量最大,土壤贫瘠的茶园数量最小; 相同土壤肥力的茶园,10年生茶园根际细菌的数量最大,4年生的次之, 20年生的最小;根际真菌的数量,土壤肥沃茶园的较小,中等和贫瘠茶园 的较大。根际放线菌的数量,20年生茶园的明显高于4年和10年生茶园的, 而且,土壤贫瘠茶园的数量较大。 相同肥力的土壤中,固氮菌的数量随茶龄的增加而减少,但减少的幅度 以贫瘠土壤最大;解磷和解钾细菌也显示了随茶龄的增加数量减少的趋势, 但肥沃土壤中,茶树达到10年时减少的幅度不明显,20年生茶树急剧减少; 中等和贫瘠土壤中茶龄达到10时便明显减少。相同茶龄的土壤中固氮菌的 数量随土壤肥力的降低而减少;在4年生茶园里,解磷和解钾细菌的数量 与土壤肥力关系不大:在10年生茶园里,随肥力的降低而减少;在20年 生茶园里,随土壤肥力降低而有所增加。 2从茶树根际中获得产植物激素纯化细菌分离物3个,固氮细菌纯化分 离物10个,解磷细菌纯化分离物8个,解钾细菌纯化分离物2个,筛选获 得对多种植物病原真菌具有较强拮抗作用的细菌1株。 3对分离的茶树根际促生细菌经培养特征观察、生理生化指标测定,鉴 IV 孢杆菌属(Bacillus);A95的拮抗细菌经培养特征观察、生理生化指标测定、 A95,GENEBANK注册号为 globisporus globisporus),定名为Bacillus AY292989。 4Bacillus G-100 A95菌株发酵液经硫酸铵沉淀、Sephadex gtob卸o,-us Fast G一50层析、真空冷 柱层析、DEAE—Sepharose Flow柱层析、Sephadex 冻干燥,获得纯化抗菌蛋白, 经SDS—PAGE测定其分子量为40.7KD,经 稳定性检测表明该蛋白在100℃条件下煮沸55rain仍具有拮抗活性,对胰蛋 白酶、蛋白酶K不敏感,对氯仿较敏感,对于较大范围的pH值变化不敏 感。 关键词:茶;根际微生物;根际促生细菌;抗菌蛋白;纯化 V StudiesOH Rhizobaeteria Plant Growth-Promoting of Tea Rhizosphere SUNhaixin (Forestry AgricultureUniversity) College,Shandong Abstraet microbesan is in Rhizosphere biologicalgroup

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