蓖麻毒素单克隆体制备、检测方法及单链抗体研究.pdfVIP

11111IIILIIill IlUlllLI l llll l 提要 蓖麻毒素毒性强，来源相对较广泛，是一种潜在的重要毒素战剂和生物恐 怖剂。同时蓖麻毒素又具有明显的抗肿瘤作用，利用蓖麻毒素与抗肿瘤的特异 单克隆抗体或单克隆抗体片段结合，可以制备免疫毒素，在恶性肿瘤的治疗上 具有很好的应用前景。本研究从提取纯度较高的蓖麻毒素、制备抗蓖麻毒素单 克隆抗体、建立蓖麻毒素的GICA、HPLC、SPR检测方法、到构建重组抗蓖麻 毒素的ScFv原核表达载体等进行了系列的探索，为蓖麻毒素中毒的诊断与治疗 奠定了基础。 英文缩写词表 第一篇文献综述弟一扁 又献练还 蓖麻毒素研究进展 1蓖麻毒素与生物恐怖 communis)种子 蓖麻毒素(ricintoxin，RT)，一种来自大戟科植物蓖麻(Ricinus 的糖蛋白，是一种致命的、毒性极强的生物毒素。蓖麻毒素可引起意外中毒，也 可用于犯罪企图【10】。从第一次世界大战起，美、英、加、法等国就相继进行了 研究，使之成为一个天然毒物战剂或生化战剂。据称蓖麻毒素武器野外试验的杀 伤力，比当时使用的光气武器威力大7倍，按有效成分重量计算，其毒性比光气 蓖麻毒素作为化学武器的代号为W或WA，曾于1969年进行过野外试验。 1978年9月7日发生的著名的“马尔科夫毒伞案”中，在英国BBC工作的 前保加利亚文化官员乔治·马尔科夫，就是被克格勃间谍用一把雨伞伞尖刺中腿 部，4天后不治身亡。经查马尔科夫的伤口中有一颗直径1．7mm左右的金属弹珠， 弹珠上钻有两个0．34mm的小洞，内有剧毒的蓖麻毒素，证明死者是被蓖麻毒素 毒死的。几年后，两位前任克格勃官员承认，他们与当时的保加利亚政府共同策 划了这次暗杀。直到今天，这个小球仍然在伦敦新苏格兰场的总部展览，而马尔 科夫之死也成了历史上最著名的蓖麻毒素暗杀案。 1997年，美国情报部门在调查一起枪杀案时，在一个地下室里发现了一个 简易的实验室，里面有一些蓖麻毒素。 因RT毒性强，又无解药和疫苗。美国疾病控制中心把蓖麻毒素列为“B”类 武器一具有中度威胁。据报道，普遍认为一些中东国家有一定数量的蓖麻毒素 储存，美国、欧洲和大部分的发达国家也可能有一定数量的蓖麻毒素储存。近 10年来，研究恐怖主义的生化专家，对恐怖组织极端分子运用提纯的蓖麻毒素 袭击方式越来越担心。 据《泰晤士报》报道，2001年在阿富汗战争中，美军曾在喀布尔一住宅内 发现一堆散乱文件，其中有一份有关制造蓖麻毒素的说明，从而表明“基地”恐怖 组织也试图制造蓖麻毒素，用于恐怖活动。 2003年1月5日，英国警方收到情报称，伦敦北部居民住宅内藏有生物武 器，英国反恐警察、伦敦特别行动警察和安全警察随即对该寓所采取突然检查行 动，发现部分生物制剂。当日立即将样品送往英国化学武器研究机构进行分析化 验，7日上午化验结果、这些制剂为蓖麻毒素。他们当天就逮捕了7名来自北非 的阿尔及利亚的嫌疑人，6男1女。其中4名已被警方以“拥有制造恐怖毒品的 原料、“煽动恐怖行动等罪名起诉；另3名也分别被警方以“制造非法证件”、 “非法移民’’及“非法拥有毒品’’等罪名起诉。 目前英国政府已经要求医疗部门作好一切准备预防可能的大规模爆发蓖麻 毒素中毒。由于英国发现了恐怖分子隐藏的生化制剂蓖麻毒素，英国政府还透露， 蓖麻毒素很可能已经传人法国和北美，这起事件在欧洲人和美国人心中蒙上了重 重的阴影。 2003年11月，有关部门发现寄往美国白宫的“蓖麻毒素邮件’’，信件中的 金属小瓶上还贴有“小心密封，容器内装有蓖麻毒素，没有适当保护的情况下不 要打开’’字样的警告。2004年初，不法分子再次将蓖麻毒素邮件寄往美国白宫【4】， 引起的惊慌令人深感生物恐怖的威胁，