牛精原干细胞制和体外培养的研究.pdfVIP

摘要 实验采用三种方法对新生牛睾丸精原细胞进行了体外培养，对其形态学及组织学结构进 行观察，即①取lO-20mg的睾丸组织块，在100,6血清培养液中体外培养I周和2周，并以鲜 睾丸组织为对照组，用光学组织学和电镜组织学方法观察和比较睾丸组织及细胞结构；②将 剪碎的睾丸组织反复吹打，使曲细精管断裂成小段，然后用10％血清培养液进行培养，用以 观察该方法中体细胞和精原细胞的生长行为，把经培养后铺层的细胞固定制片，用电子显微 镜观察细胞结构变化；③用2．5％血清的培养液对精原细胞悬液进行长期培养，用来与曲细精 管段法进行对比，同时研究长期培养对精原细胞的影响；实验采用含O％、2．5％、5％和10％ 血清的培养液对精原细胞进行培养，观察血清浓度对精原细胞和支持细胞生长的影响． 研究结果表明：新生牛睾丸组织块经体外培养1周，管腔直径明显增大，管壁细胞数增 多，曲细精管管腔由实心变为空心．体外培养2周，管腔直径继续增大，管壁细胞数无明显 变化。睾丸体细胞的增殖速率随着培养液中血清浓度升高而增加，无血清组中体细胞呈负增 长。00／0、2．5％、5％和10％四组中，2．5％血清有利于精原细胞生长并形成较多的集落，同时 有利于维持精原细胞的未分化状态．曲细精管段培养法、精原细胞悬液培养法和不同血清