绵羊肺腺瘤病相基因突变的检测及绵羊、山羊内源性反转录病毒的扩增.pdfVIP

摘 要 研究背景：绵羊肺腺瘤病 (ovine pulmonary adenomatosis,OPA)是一种由绵羊 肺腺瘤病病毒（jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV）引起的肺脏肿瘤性疾病。病 原 JSRV 为 β反转录病毒。自然感染绵羊潜伏期为 2～24 个月,人工感染绵羊潜伏期 为 3～7 个月，患病绵羊病死率为 100%。世界动物卫生组织将该病列为B 类传染病。 JSRV 的 Env 蛋白是在体内和体外起主要作用的癌蛋白，有研究表明 PI3K/AKT 和 RAS-MEK-MAPK 是 JSRV Env 蛋白转化细胞的信号通路。建立特异、快速诊断方法是 本病防控的基础。病毒致病机制的研究是深入了解本病的重点。 研究目的方法：建立特异性诊断 OPA 的方法和研究 OPA 与癌症相关基因突变的 关系。本实验在 JSRV 结构基因研究的基础上参照 GenBank 中登录的JSRV 基因序列， 针对编码 Env 蛋白 YXXM 基序列设计了特异性 PCR 引物，建立了 PCR 检测方法，并 对保存的病料进行了检测。参照 SANGER、UCSC、GenBank 数据库对nras、kras、pik3ca、 egfr、p53 基因发生突变较高的位点