全新HE染色技术(长沙).ppt

临床病理组织染色技术 苏木素—伊红染色法 南华大学附属第一医院病理科 赵强 一、概述 苏木素——伊红染色即通常所说的普通染色或常规染色，是被广泛经常应用的最基本的染色方法。取苏木精（Hematoxyln）和伊红（Eosin）两个英文单词中的第一个字母，而简称为HE染色。 概 述 HE染色是生物学尤其是医学领域中的组织学、病理学及细胞学等工作必不可少的最基本染色方法，在临床病理诊断、教学和科研工作中广泛应用，具有重要价值。 HE染色主要用来显示各种组织正常成分和病变的一般形态结构以及病变的发生、发展、修复的全过程，可进行全面观察。对常规切片染色中难以判定的病变，再做特殊染色进行验证和鉴别。 二、染液及溶液的配制 1、苏木精染液的配制 2、伊红染液的配制 1、苏木精染液 苏木精染液的配制方法很多。常规HE染色用的苏木精染液多以铝离子作为苏木精的媒染剂。已往用的哈瑞（Harris）氏、埃利希（Ehrlch）氏、德拉菲尔德（Delafield）氏及迈耶（Mayer）氏苏木精染液都含钾明矾或铵明矾，故又统称明矾苏木精。其实起媒染作用的，即与苏木精色素形成色淀的只是铝离子，而不是钾，也不是铵。有的则用硫酸铝作媒染剂，故宜统称为铝苏木精染液。我们在日常工作中，用的是克拉兹（Carazzi）氏改良的苏木精染液 。日本有人将Carazzi氏苏木精染液中苏木精及氧化剂的用量增加为2倍或3倍，用于2～3μm厚切片的HE染色。国内已有报道，效果较好。 克拉兹氏改良的苏木精染液 2倍量 3倍量 苏木精 2g 3g 蒸馏水 800ml 800ml 钾明矾 50g 50ml 碘酸钠 0.4g 0.6g 甘 油 200ml 200ml Mayer’s苏木素染液 ????????? 苏木精?????????????????? ????????100 mg ????????? 蒸馏水??????????????????????????? 100 ml ????????? 碘酸钠??????????????????????????? 20 mg ????????? 硫酸铝铵??????????????????????????? 5 g 柠檬酸?????????????????????????? 100 mg 水合氯醛??????????????????????????? 5 g 用蒸馏水溶解苏木精后，依次加入碘酸钠、硫酸铝铵、柠檬酸和水合氯醛，过滤后存于4℃冰箱备用。 2、伊红染液的配制 （1）0.25～0.5%曙红Y水溶液 曙红Y????????????????????????? 0.25～0.5g 蒸馏水?????????????????????????????100ml 冰醋酸???????????????????????????????1滴 （2）0.25～0.5%曙红Y乙醇溶液 曙红Y????????????????????????????0.25～0.5g 80%乙醇????????????????????????????100ml 伊红染液的配制 曙红主要是染细胞浆和肌纤维、胶原纤维和红细胞等作为对比染色，染色适中与细胞核相衬，红兰对比鲜明。 在曙红水溶液中加冰醋酸可起促染作用， 但加酸太多，可使曙红沉淀而慢慢失效。 三、HE染色的流程 HE染色流程图（一） HE染色流程图（二） HE染 色 流 程 图㈠ 经过固定的组织取材成小块组织后 10%甲醛或AF液（10%甲醛：95%酒精：冰醋酸=8：1：1） 75%酒精（1.5小时）