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山东省无花果种资源遗传多样性评价及品种鉴定研究
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Y2332667
目 录
摘要…………………………………………………………………………………………………………………………………………..i
Abstract……………………………………….……………………………………………………………………………………………III
英文缩写词表……………………………………………………………………………………………一v
前言…………………………………………………………………………………………………………………………………1
材料与方法……………………………………………一.-.…………………………………………………10
1材料………………………………………………………………………………………………………………………………………..10
2方法………………………………………………………………………………………………………………………………………..10
2.1种质资源的搜集与保存……………………………………………………………………………….10
2.2基因组DNA提取………………………………………………………………………………………11
2.3RAPD.PCR扩增及产物鉴定…………………………………………………………………………12
2.4RAPD多样性数据统计与分析……………………………………………………………………….12
2.5RAPD标记向SCAR标记的转换……………………………………………………………………12
2.5.1琼脂糖凝胶上RAPD标记片段的回收…………………………………………………………….12
2.5.2重组质粒的构建…………………………………………………………………………………….13
2.5.3大肠杆菌DH50t感受态细胞的制备………………………………………………………………..13
2.5.4重组质粒转化感受态细胞…………………………………………………………………。………13
2.5.5提取质粒DNA………………………………………………………………………………………14
2.5.6重组质粒的酶切鉴定………………………………………………………………………………。14
2.5.7目的片段的测序……………………………………………………………………………………………15
2.5.8
SCAR引物设计及反应条什优化………………………………………………………r..…………15
2.6无花果I铺种的RAPD指纹鉴定………………………………………………………………………15
2.7无花果品种的SSR指纹鉴定…………………………………………………………………………l5
2.7.1SSR引物合成及PCR扩增…………………………………………………………………………15
2.7.2
SSR扩增结果的变性聚丙烯酰胺凝胶IU泳………………………………………………………..15
结果与分析………………………………………………………………………………………………一17
2无化果III.J髟’IJ:lJtRAPD标记……………………………………………………………………………I8
3RAPD标记片段的FI收、克隆及酶叨鉴定……………………………………………………………l9
4特异片段的测序及分析…………………………………………………………………………………22
5RAPD向SCAR标记的转换……………………………………………………………………………24
6无花果品种RAPD指纹鉴定…………………….:…………………………………………………….25
7无花果品种SSR指纹鉴定……………………………………………………………………………..27
讨 论……………………………………………………………………………………………………………………………………….29
1关于山东省无花果资源多样性问题……………………………………………………………………29
2关于无花果叶形标记的问题……………………………………………………………………………30
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