我国苹果主要病的检测及苹果褪绿叶斑病毒分子变异的研究.pdfVIP

Y2143724 摘要 苹果病毒病在世界各地广泛分布，影响严重，具有危害性强、传播扩散快和难以 治愈的特点。苹果病毒破坏和干扰果树正常生理功能，导致树势减弱，产量降低，果 实品质下降，造成严重的经济损失。 本论文针对我国四种主要苹果病毒苹果花叶病毒(么印彪mosaicvirus，ApMV)、 chlorotic stem 苹果褪绿叶斑病毒(Apple leafspot stem virus，ASPV)和苹果茎沟病毒(Applevirus，ASGV)进行研究。 pitting grooving 主要取得了以下研究结果： 1．建立了能够稳定应用于田间四种苹果主要病毒检测的RT-PCR体系：确定了适 测己发表引物和自行设计引物进行筛选；确定了最佳引物，并对各病毒RT-PCR检测 体系和程序进行优化。优化的RT-PCR检测体系能够对四种苹果病毒进行周年检测， 5,000×稀释液、10，000x稀释液、200x稀释液。 2．通过对我国13个省(市／区)327份材料进行检测，明确了我国苹果产区四种 普遍，两种病毒混合侵染率为16．5％，三种病毒混合侵染率为51．1％，四种病毒混合 为0．3％。 3．建立了能够同时检测四种苹果病毒的多重RT-PCR检测体系：利用携带ASPV、 测引物组合进行筛选，在此基础上加入苹果内源基因引物，并对检测体系和程序进行 优化。结果表明： 1,000xffH100x总RNA模板稀释液。最后通过检测田间样本明确了所建立的多重 RT-PCR检测体系在田问应用的可能性。 4．初步明确了我国苹果上ACLSV的分子变异情况：对来源于我国不同地域、不 分离物进行序列同源性比较和系统进化树分析。发现我国苹果上ACLSV分离物处于 2个不同组群，组群I包含了与已报道的“B6型分离物亲缘关系较近的38个分离 物，其中20个分离物CP氨基酸变异位点较为特殊，在系统进化树中与已报道的“B6 型分离物处于组群I的不同亚组中。组群II包含与已报道“P一205型”分离物亲缘 关系较近的16个分离物。经过对来源于不同寄主、不同种植地域、不同苹果品种的 地域无明显相关性，与苹果品种可能有相关性。 关键词：苹果病毒；RT-PCR；多重RT-PCR；分布；分子变异 The detectionofmain virusesand apple themolecular variabilityanalysisofApple chlorotic in virusChina leafspot Author：JiZhi—rui Ya—nan Adviser：Wang Cao Ke—qiang Specialty：Plant Pathology Abstract virus Apple diseasesare distributed the widely throughout fasta