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洋葱lfy同源因的克隆与表达分析
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目 录
目 录
中文摘要……………………………………………………………………………………………．I
英文摘要……………………………………………………………………………………………III
1前言………………………………………………………………………………………………………………………………．1
1．1研究的目的和意义……………………………………………………………………………l
1．2国内外研究进展………………………………………………………………………………．2
1．2．1植物成花机理研究进展……………………………………………………………………2
1．2．2花发育相关基因研究进展………………………………………………………………．．7
1．2．3
LFY基因研究进展…………………………………………………………………………9
1．3技术路线……………………………………………………………………………………．15
2材料与方法………………………………………………………………………………………16
2．1试验材料……………………………………………………………………………………．16
2．1．1植物材料……………………………………………………………………………………16
2．1．2主要试剂与试剂盒………………………………………………………………………．16
2．1．3菌株及载体………………………………………………………………………………．16
2．1．4试验仪器…………………………………………………………………………………16
2．1．5引物合成与测序…………………………………………………………………………．17
2．2试验方法……………………………………………………………………………………．．18
2．2．1植物总RNA的提取………………………………………………………………………．18
2．2．2
cDNA模板的制备…………………………………………………………………………19
2．2．3洋葱AcLFY基因保守区的克隆…………………………………………………………．19
2．2．4
3’RACE试验………………………………………………………………………………………………………．22
2．2．55RACE试验………………………………………………………………………………………………………．23
2．2．7洋葱AcLFY基因DNA的克隆…………………………………………………………．．26
2．2．8洋葱AcLFY基因的时空表达分析………………………………………………………．27
2．2．10分蘖洋葱AcADLFY基因的半定量表达分析…………………………………………28
2．2．1l序列结构的生物信息学分析…………………………………………………………………29
3结果与分析…………………………………………………………………………………………30
3．1RNA提取结果检测……………………………………………………………………………30
3．2
cDNA模板的检测……………………………………………………矗……………………。30
3．3洋葱AcLFY基因保守区的克隆…………………………………………………………………………3l
3．4
3RACE试验结果分析……………………………………………………………………………32
3．55’RACE试验结果分析……………………………………………………………………………33
I
东北农业大学农学硕士学位论文
3．6．2
AcLFF的同源序列比对和系统发育树构建……………………………………………。38
3．6．3AcLFY蛋白三维立体结构预测…………………………………………………………。4l
3．7洋葱AcLFY基因组DNA的克隆…………………………………………………………。4l
3．8洋葱AcLFY基因时空表达的qPCR检测…………………………………………………．．43
3．10分蘖洋葱彳“脱，y基因的半定量表达分析………………………
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