滴灌条件下加工茄根腐病发生原因分析及生防菌防病机制研究.pdf

滴灌条件下加工番茄腐霉根腐病发生与根围 微生物动态变化关系及生防菌防病机理研究 摘要 针对新疆加工番茄根腐病发生严重、许多化学农药禁止在加工番茄上使用和 缺乏有效防治药剂的情况，本论文采用形态学和分子生物学方法对新疆加工蕃茄 根腐病病原菌进行了鉴定；采用纯培养法和免培养法等方法对不同发病程度植株 根际微生物种群结构作了分析；分离、筛选和鉴定了能够有效防治加工番茄根腐 病的生防菌，并对其中2个防效良好的枯草芽孢杆菌作了防病机理研究，为新疆 加工蕃茄根腐病的生物防治提供理论和技术上的参考，本研究所获主要结论如下： 1．在加工番茄主产区采集和分离了162个根腐病病样，获得了120株分离物， 其中腐霉菌分离物为93株，占总分离物的77．5％，采用形态学和分子生物学等方 另有29个分离物由于无法诱发出雄器和藏卵器而无法将其鉴定到种。 ． 2．采用土壤生物学和微生物生态学等方法和技术，对健康、发病和死亡的加工 蕃茄根际土壤的土壤质量进行了评价，结果表明，健康加工番茄有更多的细菌和 放线菌，而真菌数量相对于发病和死亡植株根际土壤的要少。同时脂肪酸分析和 微生物分子指纹图谱DGGE分析结果也表明，健康植株根际土壤有着更加复杂的微 生物种群结构和生物活性，更有利于保持番茄植株的健康，对不同发病程度加工 番茄根际土壤的磷酸酶、过氧化氢酶、蛋白酶、脲酶、蔗糖酶以及纤维素酶活性 进行了分析，表明除纤维素酶活性外，植株健康程度与其他5种酶活性高低呈线 性相关，健康植株根际土壤酶活性高于发病和死亡植株的。从理论上证明了土壤 健康状况与加工蕃茄根腐病发生轻重程度有密切的关系。 3．采用稀释分离法从新疆各主要加工番茄产区土壤中分离到细菌842株和放 线菌187株，通过继代平皿对峙培养筛选到对瓜果腐霉、立枯丝核病菌(兄solani)、 番茄枯萎病菌(g．oxysporum 疫病菌(A 株，通过促芽、毓栽、小区和大ffl试验筛选到了2个能够有效防治加工番茄腐霉 根腐病的生防菌$37和$44，其不仅可以促进番茄种子发芽和促进番茄植株生物量 的增加，还可以促进番茄提前丌花和提前结果，具有明显的增产作用，同时由于 它们是从新疆本土筛选获得，能够适应新疆独特的地理气候环境。对这2株生防 菌进行了形态学、生理生化和分子生物学测定，均被鉴定为是枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis)。。 4．采用植物生理生化、土壤生物学和土壤微生物生态学等方法与技术对生防菌 $37和$44防治根腐病的机理进行了初步研究。结果证明生防菌能够保持种子活力， 促进种子提前发芽，同时能够诱导植株与抗病性有关的酶，如多酚氧化酶、过氧 化氢酶和超氧化物歧化酶活性的提高。将生防菌拌种和采用随水滴施到加工番茄 根部后，滴施2次可以达到最佳防病效果，能够显著增加加工番茄根际土壤中磷 酸酶、过氧化氢酶、蛋白酶、脲酶、蔗糖酶以及纤维素酶活性，提高微生物生物 量碳、氮和磷的量以及微生物种群多样性，但滴施3次后防病效果有所下降，同 时出现土壤活力和微生物种群多样性下降。对照化学农药甲霜灵虽然也有较好的 防病效果，但会降低土壤中酶活，微生物生物量以及微生物种群多样性，造成土 壤质量下降。该生防菌起到了调节根际微生物种群结构和提高土壤质量的作用。 关键词：加工番茄 腐霉 根腐病 生防细菌 健康土壤根际微生物群落 滴 灌 诱导抗病性 ． 11 rot withmicrobial Relationsof rootoftomato Pythium of communitiesofthe andcontrolmechanism rhizosphere 一