轮枝镰孢(fuarium verticillioide)五种疏水蛋白的功能研究.pdfVIP

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2016-02-23 发布于贵州
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轮枝镰孢(fuarium verticillioide)五种疏水蛋白的功能研究.pdf

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轮枝镰孢(fuarium verticillioide)五种疏水蛋白的功能研究

英文缩略词及中文对照目录中文摘要……………．．………．．。．．．．。．．．。…．——．．。。…。…．一——………．．。——————————·····：一I Abstract……．．．…．．．．．．．．。…．。…。——。．．一…。。．．．．．—．——．．．．．—。．。。．…—．。．。．．．．．．．．．．．．．．—．一Ⅲ 1前言 l 1．1菌寄生研究现状与进展……………………………………………………-……………l 1．1．1寄生真菌与寄生菌初始相互识别………………………………………………………l 1．2．2寄生性真菌与寄生菌识别信号的传导途径……………………………………………2 1．2．3寄生性真菌与寄生菌互作产生的水解酶类研究……………………………………。2 1．2疏水蛋白的研究进展……………………………………………………………………．3 1．2．1疏水蛋白的理化性质和一级结构研究…………………………………………………3 1．2．2疏水蛋白对病原真菌致病性及与其寄主互作的研究………………………………。4 1．2．3疏水蛋白其他功能的研究……………………………………………………………．．5 1．2．4疏水蛋白的自我组装及原子力显微镜的观察研究……………………………：……。6 1．2．5疏水蛋白空间结构的研究……………………………………………………………一6 1．2．6疏水蛋白的应用研究……………………………………………………………………7 1．2．7轮枝镰孢疏水蛋白的研究现状………………………………………………………。8 1．3巴斯德毕赤酵母表达系统………………………………………………………………．9 O 1．4组氨酸标签(His-Tag)的镍柱亲和层析……………………………………………。1 1．5真菌基因转化及基因敲除的研究………………………………………………………10 1．5．1丝状真菌的转化方法…………………………………………………………………lO 1．5．2真菌基因敲除的研究…………………………………………………………………10 1．5．3轮枝镰孢的转化方法研究……………………………………………………………．12 1．6植物防御反应基因的相关研究…………………………………………………………12 1．7选题的目的意义、研究内容和技术路线………………………………………………13 1．7．1选题的目的意义…………………………………………………………………………13 1．7．2研究内容…………………………………………………………………………：……～14 2材料与方法 15 2．1材料…………………………………………………………………………………………………………………一15 2．1．1供试菌株………………………………………………………………………………l5 2．1．2菌株与质粒……………………………………………………………………………．．15 I 2．1．3主要生化和分子生物学试剂以及酶…………………………………………………15 2．1．4仪器………………………………………………………………………………………………………………。15 2．1．5培养基……………………………………………………………………………………16 2．1．6溶液配制………………………………………………………………………………16 2．2实验方法……………………………………………………………………．．．…………．18 2．2．1．1．1轮枝镰孢总RNA的提取及检测…………………………………………………l8 2．2．1．1．3反转录eDNA第一链的合成……………………………………………………．．19 2．2．1．1．4引物设计………………………………………………………………………………．19 2．2．1．1．6 PCR产物的回收…………………………………………………………………。20 2．2．1．1．7回收产物与克隆载体连接