马铃薯连作土壤根际微生物区系变化的研究.pdfVIP

fIIIIIIIIIrlllllllllll／／M／／IllUI 目录 Y2419737 摘要……………………………………………………………1 Abstract．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．：! 引言．．．．……．．．．．．．．．．．．．…．．．．．．．．．．．．．．．．…．．．．．．．．……．．．．．．．．．．．．3 文献综述……………………………．………．…………………．．8 1．马铃薯连作危害………………………………………………．8 2．防控马铃薯连作土传病害的研究进展………………………………10 3．根际微生物间相互关系，群落功能的转变…………………………．．11 4．研究使用的方法………………………………………………13 7 1材料和方法……………………………………………………．1 1．1作物生长条件………．………………．………．．……………17 7 1．2土壤样品的采集和处理、土壤性质的测定…………………………．1 1．3土壤总DNA提取……………………………………………．．18 1．4可培养真菌的分离研究………………………………………．．18 1．5微生物分子生态技术研究………………………………………19 1．6结果数据分析………………………………………………．22 2．结果与分析……………………………………………………．23 2．1纯菌株的平板分离……．……．…………．……………………23 2．2DGGE指纹图谱分析．…………．……………．………………．．25 2．3克隆文库分析………．…………．………………．……．…．．26 2．4454测序技术结果…．．……．．………．．．．．………．．．…………32 3讨论…………………………………………………………．．45 参考文献…………………………………………………………47 致谢……………………………………………………………．57 陆丽华 马铃薯连作土壤中根际微生物区系变化的研究 摘要 本文对甘肃马铃薯连作土壤进行真菌群落多样性分析，运用传统平板培养 和现代微生物分子生态学研究方法(变性梯度凝胶电泳、克隆文库、454测序 技术)，综合分析土壤中真菌群落结构和生态功能的变化。克隆文库分析表明， 随着连作年限的增加，根际土壤中微生物群落结构发生变化，子囊菌门 (Ascomycota)逐渐成为优势群；而通过454研究分析表明，主要优势菌群没 更高层次的团体之间(可能为非优势菌群)则存在显著的不同；研究中发现， 健康土壤中存在着更多能和其它真菌类群进行交流的群体——活跃分子，这些 群体在感病土壤中的交流能力则有所下降；通过统计不同连作年限中茄病镰刀 菌仔协aHumsolani)的数量，可以发现，随着连作年限的增加，茄病镰刀菌的 数量有显著的升高；且其它病原真菌与土壤中微生物之间也存在一定的相关性， 有些呈正相关，有些则呈负相关。目前研究发现，土壤性质对健康和感病土壤 中真菌群落有很大的影响。感病土壤中土壤性质和真菌群落间大致以负相关性 存在，健康土壤中则比较平衡，其中土壤有机质(OM)与健康群落之间联系十 分密切，而铵态氮(NH4+-N)和电导率(Ec)是感病土壤的关键因素。这两个 因素和肥料的施用有关，因此，该土壤连作障碍的因素中肥料的管理是主要因 素。进一步分析发现，健康土壤和感病土壤中存在着一些交叉的真菌群落，可 见随着连作年限的增加，土壤性质会改变一些真菌团体的变化，可能导致土壤 中真菌功能的变化，从而改变土壤的种植状况。 关键词：连作障碍，连作，微生物群落多样性，真菌相互关系，454测序 2 扬州大学硕士学位论文 Abstract This focusonthe