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马铃薯病毒多重t-pcr检测和pvs(内蒙分离株)部分序列的测定
目 录
摘要….....…..…........…......…..………..………………..….。….1
Abstract…………………………………………………………………….3
1前言……………………………………………….……………………………5
1.1马铃薯种植情况……......…........…...……..…..…..………….5
1.2马铃薯Y病毒、S病毒和马铃薯卷叶病毒概况.……………………………6
2马铃薯病毒检测方法研究进展…….…….………….…….………….….8
2.1生物学检测方法……………….……………………………………9
2.1.1目测法….…......……...…....……….…...…...…..…........9
2.1.2指示植物鉴定法……….…….…..…….…………………….….9
2.2免疫学方法....….....….............……......…….....…...........9
LISA)…………….………….………………9
2.2.1酶联免疫吸附测定(E
S—ELlSA)…………….………………………….10
2.2.2双抗体夹心法(DA
CM.ELl SA)………….…………………………..10
2.2.3斑点免疫吸附法(N
B LI
2.2.4生物素一亲和素.酶联免疫吸附法(AC.E SA)…………………………11
EM)………………………………….…….……….11
2.2.5免疫电镜方法(I
1
2.3分子生物学方法……………………………………………………………..1
eicacid ridization)………………………12
2.3.1核酸分子杂交技术(NticI hyb
ASH)………………………………………...12
2.3.2核酸斑点杂交技术(N
2.3.3PCR微量板杂交技术(PCR—mic 3
roplate
C 3
2.3.4聚合酶链式反应(PR)……..………….………………………..1
2.3.4.1简并引物PCR技术(PCRwith Primer)……………………..14
Degenerate
4
2.3.4.2反转录PCR酶联免疫法(RT.PCR—ELlSA)…………………………….1
CR(1C—RT—PCR)…………………………………...14
2.3.4.3免疫捕捉RT.P
2.3.4.4实时荧光定量RT.PCR(RTi.PCR)………………………………….15
CR(CF.RT.PCR)………………………….……….15
2.3.4.5荧光竞争.RT—P
CR(MuI ti 1 ex RT—PC
2.3.4.6多重RT—P P R)….…….……..…….………16
6
3材料与方法…….…….……….…………….………………………1
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