马铃薯病毒多重t-pcr检测和pvs(内蒙分离株)部分序列的测定.pdfVIP

马铃薯病毒多重t-pcr检测和pvs(内蒙分离株)部分序列的测定.pdf

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马铃薯病毒多重t-pcr检测和pvs(内蒙分离株)部分序列的测定

目 录 摘要….....…..…........…......…..………..………………..….。….1 Abstract…………………………………………………………………….3 1前言……………………………………………….……………………………5 1.1马铃薯种植情况……......…........…...……..…..…..………….5 1.2马铃薯Y病毒、S病毒和马铃薯卷叶病毒概况.……………………………6 2马铃薯病毒检测方法研究进展…….…….………….…….………….….8 2.1生物学检测方法……………….……………………………………9 2.1.1目测法….…......……...…....……….…...…...…..…........9 2.1.2指示植物鉴定法……….…….…..…….…………………….….9 2.2免疫学方法....….....….............……......…….....…...........9 LISA)…………….………….………………9 2.2.1酶联免疫吸附测定(E S—ELlSA)…………….………………………….10 2.2.2双抗体夹心法(DA CM.ELl SA)………….…………………………..10 2.2.3斑点免疫吸附法(N B LI 2.2.4生物素一亲和素.酶联免疫吸附法(AC.E SA)…………………………11 EM)………………………………….…….……….11 2.2.5免疫电镜方法(I 1 2.3分子生物学方法……………………………………………………………..1 eicacid ridization)………………………12 2.3.1核酸分子杂交技术(NticI hyb ASH)………………………………………...12 2.3.2核酸斑点杂交技术(N 2.3.3PCR微量板杂交技术(PCR—mic 3 roplate C 3 2.3.4聚合酶链式反应(PR)……..………….………………………..1 2.3.4.1简并引物PCR技术(PCRwith Primer)……………………..14 Degenerate 4 2.3.4.2反转录PCR酶联免疫法(RT.PCR—ELlSA)…………………………….1 CR(1C—RT—PCR)…………………………………...14 2.3.4.3免疫捕捉RT.P 2.3.4.4实时荧光定量RT.PCR(RTi.PCR)………………………………….15 CR(CF.RT.PCR)………………………….……….15 2.3.4.5荧光竞争.RT—P CR(MuI ti 1 ex RT—PC 2.3.4.6多重RT—P P R)….…….……..…….………16 6 3材料与方法…….…….……….…………….………………………1

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