分子生物学人类基因组DNA提取等精要.pptVIP

一.材料 一份提取总DNA的细胞或组织 1.5ml、 微量离心管、微量移液器与吸头、15ml离心管、锥形瓶（500或1000ml）。 二.设备 离心机、电子天平、恒温水浴箱、紫外分光光度计、电泳仪、电泳槽、凝胶成像仪、微波炉或沸水浴、透射紫外灯。 三.试剂 1.细胞核裂解液(STE)：0.1 mol/L NaCl，10mmol/L Tris-HCl，1mmol/L EDTA 2.0.8%（W/V）标准琼脂糖； 3.0.5×TBE缓冲液 4.其他试剂：TE缓冲液或重蒸馏水、氯仿/异戊醇（24:1，V/V）、异丙醇或无水乙醇、电泳加样缓冲液、溴化乙锭（EB） 实验材料 1.生理盐水 2.1×细胞核裂解液（SET）：0.5ml 2mol/L Tris-HCl pH8.2 ，10ml 4mol/LNaCl ，0.4ml 2mmol/LEDTA，加蒸馏水至100ml 3.10%SDS：SDS10g，加水至100ml 4.20mg/ml蛋白酶K 5.Tris-饱和酚 6.氯仿 7.无水乙醇 8.TE（缓冲系统）：10mol/L Tris-HCl(PH8.0)，1mol/LEDTA(PH8.0) 1.EDTA：钙离子络合剂，在分子生物学实验中是二 价金属螯合剂，抑制核酸酶，降低细胞膜的稳定性； 2.SDS（十二烷基硫酸钠）：是一种去污剂，破坏细 胞膜的脂