乌贼墨多糖干预磷酰胺介导睾丸氧化应激损伤的nrf2are调控机制研究.pdfVIP

乌贼墨多糖干预环磷酰胺介导睾丸氧化应激损伤的 Nrf2/ARE 调控机制研究 摘要 目前，研 已证实乌贼墨多糖 （SIP ）是一类具有广泛生物学功能的海洋生物活 性物质，可用于食品、保健及医疗等领域。本实验室研究人员长期致力于研 SIP 的化疗预防作用，发现该功能具有广谱高效等特性，不仅能有效保护心、肺、肝、 脾等内脏器官，也能降低环磷酰胺 （CP ）对睾丸的毒性损伤。本研 旨在探讨 SIP 干预 CP 介导睾丸氧化应激损伤的作用效果及其相关机理。 首先，本实验通过酶提醇沉方法从乌贼墨中分离得到粗多糖样品，然后经柱层 析纯化多糖样品，并测定纯多糖的纯度、分子量及红外分析。经分离纯化得到单一 的洗脱多糖样品，该样品重均分子量为 37068Da 。纯度鉴定显示在 260nm 及 280nm 处无吸收峰，说明不含蛋白质及核酸等杂质。高效液相色谱图谱分析显示只有一个 峰，且峰形较对称，峰宽较窄，说明该样品较纯。红外分析显示拥有多糖特征吸收 峰和硫酸根基团特征吸收峰。 60 只健康的雄性昆明小白鼠，随机分为 6 组。实验周期 10 周，检测小鼠生殖 器官指数、精子参数、睾丸组织切片及雄性生殖能力。实验结果显示 CP 能导致雄 性生殖损伤，与前人研究结果相一致。CP 组，小鼠体重、睾丸重量及附睾重量显著 （p 0.01 ）降低，睾丸指数显著 （p 0.05 ）下降，附睾指数差异不显著 （p 0.05 ）； 精子数、精子存活率显著 （p 0.05 ）下降，各种畸形精子数及精子畸形率显著（p 0.05 或p 0.01 ）提高；睾丸组织损伤严重，各阶段生精细胞数量减少，尤其是初级生精 细胞，各曲细精管间间隙增加，睾丸间质细胞损伤，曲细精管直径显著 （p 0.01 ） 减小；雄性生殖能力下降，雌性小鼠受孕率降低，每窝胎儿数和活胎率显著 （p 0.01 ） 降低，死胎儿率显著 （p 0.0 1）升高，畸形胎儿率变化不显著 （p 0.05 ）。与模型 组相比，SIP 治疗组除在精子数、中尾折角精子数及畸形胎儿率无显著 （p 0.05 ） 改善，其他各指标都有明显改善 （p 0.05 或p 0.01 ），说明 SIP 能干预环磷酰胺介 导睾丸生殖损伤的作用效果。 40 只健康的雄性昆明小白鼠，随机分为 4 组，空白组、模型组、乌贼墨多糖组、 治疗组。实验周期 10 周，处死小鼠，检测睾丸组织中标志性酶活力、血清中性激素 水平及氧化应激损伤等相关指标。实验结果显示与模型组相比，SIP 显著 （p 0.05 或p 0.01 ）改善 CP 导致睾丸中标志性酶活力的异常变化，如 LD 活力显著（p 0.05 ） 上升，AKP 、ACP 及 γ-GT 活力显著 （p 0.05 或p 0.01 ）下降，且 LD 、ACP 及 γ-GT 活力与空白组无显著 （p 0.05 ）差异；改善 CP 介导血清及睾丸中性激素水平的异 I 常变化，血清中 FS 、E 和 L 水平显著 （p 0.05 或p 0.01 ）降低，血清及睾丸中 T 水平显著 （p 0.01 ）提高；缓解